| 摘 要： | 目的:探讨人生存素(Survivin)抑制剂YM155{4,9-二氢-1-(2-甲氧基乙基)-2-甲基-4,9-二氧代鄄3-(2-吡嗪甲基)-1H-萘并[2,3-d]咪唑鎓溴化物}对甲状腺癌B-CPAP 细胞活力和凋亡的影响以及凋亡相关酶半胱氨酸蛋白酶-3(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3),半胱氨酸蛋白酶鄄8(Cysteinyl aspartate specific proteinase-8,Caspase-8)和半胱氨酸蛋白酶-9(Cysteinyl aspartate specific proteinase-9,Caspase-9)表达的变化,探讨其诱导B-CPAP 细胞凋亡的可能机制。方法:体外培养B-CPAP 细胞,分别以0、0.5、1、2、4、8 nmol/ L 浓度的YM155 进行处理24 、48 和72 h,采用CCK-8 检测试剂盒检测YM155对B-CPAP 细胞活力的抑制作用;B-CPAP 细胞随机分为4 组:分别以0、1、2 nmol/ L YM155 和5 μmol/ L 顺铂(Cisplatin,阳性对照组)处理24 h。分别采用TUNEL 染色和流式细胞仪AnnexinV-FITC/ PI 法检测凋亡的情况;采用RT-PCR 检测Survivin mRNA 的表达;采用比色法和Western blot 检测Survivin 和Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 的活性和表达。结果:与0 nmol/ L 组比较,YM155 对B-CPAP 细胞活力具有明显抑制作用,并诱导B-CPAP 细胞凋亡(P<0.05 或P<0.01);与阴性对照组比较,YM155 显著降低B-CPAP 细胞Survivin 的表达,并上调Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 的表达(P<0.05 或P<0.01)。结论:YM155 对B-CPAP 细胞活力具有抑制作用,诱导其凋亡,其机制可能与上调Caspase-3、Caspase-8 和Caspase-9 表达有关。
|
