| 致肾盂肾炎大肠埃希菌132基因组DNA消减文库的构建 |
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| 引用本文： | 宋立学,陈锦英.致肾盂肾炎大肠埃希菌132基因组DNA消减文库的构建[J].天津医科大学学报,2006,12(1):1-3,13. |
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| 作者姓名： | 宋立学 陈锦英 |
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| 作者单位： | 天津医科大学微生物学教研室,天津,300070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助(30470096) |
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| 摘 要： | 目的:应用抑制性消减杂交技术,构建致肾盂肾炎大肠埃希菌132株(UPEC132)与已完成基因组测序的非致病性大肠埃希菌标准株MG1655的基因组DNA消减文库。方法:分别提取UPEC132与MG1655的基因组DNA,经RsaⅠ酶切成为大小200～800bp的片段,一部分与接头连接作为tester,和未与接头连接的酶切片段(driver)进行2次消减杂交及2次抑制性PCR后将产物与pMD18-T载体连接构建DNA消减文库,并转化给大肠埃希菌TOP10构建消减文库。结果:文库扩增后得到139个克隆,经PCR法快速测定,均得到200～800bp的插入片段。结论:所构建的基因组DNA消减文库为进一步筛选UPEC132中与致病相关基因奠定了基础。
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| 关 键 词： | 致肾盂肾炎大肠埃希菌 抑制性消减杂交 聚合酶链式反应 |
| 文章编号： | 1006-8147（2006）01-0001-04 |
| 收稿时间： | 2005-10-26 |
| 修稿时间： | 2005-10-26 |
Construction of DNA subtractive library of uropathogenic E.coli132 |
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| SONG Li-xue,CHEN Jin-ying.Construction of DNA subtractive library of uropathogenic E.coli132[J].Journal of Tianjin Medical University,2006,12(1):1-3,13. |
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| Authors: | SONG Li-xue CHEN Jin-ying |
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| Institution: | Department of Microbiology, Tianjin Medical Univesity, Tianjin 300070, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Uropathogenic E coli SSH PCR |
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