| 经门静脉高通量注射裸DNA FasL质粒导入大鼠肝脏表达的实验研究 |
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| 作者姓名： | 许彪 陈婧 胡瑾华 徐东平 王业东 王慧芬 |
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| 作者单位： | 1.100039,北京 解放军第三○二医院重症监护中心;2.100039,北京 解放军第三○二医院肝衰竭诊疗中心;3.100039,北京 解放军第三○二医院医院办公室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(81171641);中美重大肝病合作计划(2009DFA32450) |
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| 摘 要： | 目的 建立经门静脉高通量注射将裸DNA质粒导入大鼠肝脏表达的实验方法,观察FasL在肝脏的表达、对肝损伤及肝功能生化指标变化的影响.方法 对大鼠经门静脉高通量注射质粒pDC316-LacZ,观察LacZ基因在大鼠肝脏的表达情况.将11只大鼠随机分为实验组6只(注射pDC315-rFasL),对照组5只(注射pDC316-LacZ),经门静脉高通量注射将大鼠FasL真核质粒导入大鼠肝脏.分别于术后第1、3～4、6天处死大鼠,术前、术后取血查ALT和AST,肝组织进行RT-PCR、Western印迹及常规HE染色和免疫组织化学实验.结果 经门静脉高通量注射了pDC316-LacZ的大鼠肝脏,可观察到蓝色沉淀物质在肝组织表达.经门静脉将FasL质粒导入大鼠肝脏,24 h后取肝组织通过RT-PCR和Western印迹实验证实FasL在肝脏中表达.免疫组织化学结果表明在术后实验组肝组织大量表达FasL.常规HE染色显示实验组术后肝小叶中肝细胞嗜酸性变及凋亡小体明显高于对照组.术后第1天实验组与对照组ALT、AST水平显著升高.第3～4天对照组恢复正常,但实验组于术后第6天才基本正常.结论 初步建立了门静脉高通量注射将裸DNA质粒导入大鼠肝脏表达的实验方法.肝细胞表达FasL可能成为效应细胞致邻近肝细胞凋亡.
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| 关 键 词： | 肝脏 裸DNA 高通量注射 凋亡 Fas配体 |
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