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人卵黄囊间质干细胞多向分化潜能的实验研究
作者姓名:那晓东  赵自平  张秀明  朱美玲  黄春浓  宋新民  李树浓
作者单位:1. 中山大学中山医学院病理生理学教研室,广东,广州,510080
2. 中山大学附属第三医院骨科,广东,广州,510630
3. 深圳市宝安区血站,广东,深圳,510020
4. 中山大学中山医学院遗传学教研室,广东,广州,510080
基金项目:国家自然科学基金,中国博士后科学基金,广东省自然科学基金
摘    要:
[目的]分离纯化及体外观察人卵黄囊间质干细胞(hYS-MSC)的多向分化潜能.[方法]卵黄囊单细胞悬液经贴壁培养、传代纯化得到hYS-MSC,并从细胞表型及生物学特性等方面对其进行鉴定;采用地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C作成骨诱导剂、β-巯基乙醇或复方丹参注射液作为神经诱导剂、地塞米松、消炎痛、胰岛素作为成脂诱导剂诱导hYS-MSC向成骨细胞、神经细胞及脂肪细胞定向分化.组织化学方法作成骨检测;免疫组化方法检测NSE、NF及GFAP在经神经诱导hYS-MSC中的表达;油红O染色检测中性脂肪.[结果]hYS-MSC易于纯化,在培养过程中保持正常核型,具有较大增殖能力.hYS-MSC CD29、CD44、CD166及CD105表达阳性,CD34、CD45和CD86为阴性;AKP弱阳性.hYS-MSC经成骨诱导AKP强阳性,诱导两周后形成钙盐沉积形成的矿化区.hYS-MSC经神经诱导可见NSE、NF或GFAP阳性细胞,符合神经元及胶质细胞的生物学特征.hYS-MSC经成脂诱导转化为大小不等的园形或椭圆形细胞,胞浆内可见脂滴形成,胞核被挤于细胞的一侧,经油O染色脂滴染橘红色,符合脂肪细胞的生物学特征.[结论]hYS-MSC与成体MSC表型一致,具有较大增殖及多向分化潜能,在体外可以诱导分化为成骨细胞、神经元、胶质细胞及脂肪细胞.

关 键 词:间质干细胞  胚胎发育  分化
文章编号:1672-3554(2005)3S-0095-04
修稿时间:2005-03-10
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