| shRNA介导的Iduna沉默对肺癌A549细胞系细胞周期及其相关蛋白表达的影响 |
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| 引用本文： | 高 英 李 锐 徐慧慧等. shRNA介导的Iduna沉默对肺癌A549细胞系细胞周期及其相关蛋白表达的影响[J]. 实用口腔医学杂志, 2014, 0(8): 851-854 |
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| 作者姓名： | 高 英 李 锐 徐慧慧等 |
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| 作者单位： | ;1.中国医科大学附属第四医院病理科;2.中国医科大学附属第四医院中心实验室;3.中国医科大学附属第一医院病理科 |
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| 摘 要： | ![]()
目的利用shRNA沉默E3泛素连接酶Iduna基因,观察Iduna对非小细胞肺癌细胞系A549细胞周期及其相关蛋白表达的影响。方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法筛选Iduna高表达细胞系。构建shRNA-Iduna真核表达载体,瞬时转染A549细胞,蛋白印迹法检测转染效率。流式细胞仪检测细胞周期变化。蛋白印迹法检测细胞周期相关蛋白的表达。结果蛋白印迹法筛选Iduna高表达细胞系显示A549和SPC细胞中Iduna mRNA和蛋白水平高于其他细胞系。shRNA-Iduna转染A549细胞系后,流式细胞仪检测细胞周期显示干扰组G0/G1期比例增加,S期比例相对减少(P<0.05)。蛋白印迹法检测与细胞周期相关的G1/S期调控蛋白[细胞周期蛋白(cyclin)A、cyclin D1、cyclin E、CDK2、CDK4、CDK6、P21、P27、P53等]的表达情况,结果显示干扰组cyclin D1、cyclin E和CDK4蛋白表达减少(P<0.05)。结论 Iduna可能通过调控cyclin D1、cyclin E和CDK4蛋白的表达,使细胞阻滞于G0/G1期,从而调节肺癌细胞周期进程。
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| 关 键 词： | 癌,非小细胞肺 泛素蛋白连接酶类 细胞周期 细胞周期蛋白类 |
Effect of Iduna gene silencing by shRNA on lung cancer cell line A549 cell cycle and related regulatory proteins expression |
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| Abstract: | ![]()
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