| HBV全基因组克隆转染细胞系的建立 |
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| 引用本文： | 赵艳芳,闫永平,苏海霞,王安辉,张磊,张景霞,门可,徐德忠.HBV全基因组克隆转染细胞系的建立[J].第四军医大学学报,2006,27(12):1130-1133. |
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| 作者姓名： | 赵艳芳 闫永平 苏海霞 王安辉 张磊 张景霞 门可 徐德忠 |
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| 作者单位： | 第四军医大学军事预防医学系流行病学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学军事预防医学系流行病学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学军事预防医学系流行病学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学军事预防医学系流行病学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学军事预防医学系流行病学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学军事预防医学系流行病学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学军事预防医学系流行病学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学军事预防医学系流行病学教研室,陕西,西安,710033 |
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| 摘 要： | 目的:建立HBV体外细胞培养体系. 方法:构建HBV全基因克隆质粒pcDNA3-3HBV,稳定转染HepG2细胞,G418筛选. ELISA检测细胞上清液HBsAg,HBeAg的表达,免疫组化检测细胞内HBcAg的表达,RT-PCR检测细胞S基因mRNA的表达,PCR检测细胞上清液DNA. 结果:成功构建了HBV全基因克隆质粒pcDNA3-3HBV,稳定转染HepG2后,培养上清HBsAg,HBeAg阳性,细胞内HBcAg呈核浆型分布,且以浆型分布为主. RT-PCR证实有HBV S基因 mRNA 的表达,上清中HBV S及前S基因阳性,荧光定量PCR检测显示培养上清中HBV 滴度达1×108拷贝/L. 结论:重组质粒pcDNA3-3HBV能在HepG2细胞中表达、转录、复制,该细胞培养体系能产生较高水平的HBV.
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| 关 键 词： | 肝炎病毒 乙型 基因组 病毒 克隆 分子 转染 细胞培养 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-2790(2006)12-1130-04 |
| 收稿时间： | 10 31 2005 12:00AM |
| 修稿时间： | 11 28 2005 12:00AM |
A cell culture system transfected with full-length DNA clone of hepatitis B virus |
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| ZHAO Yan-Fang,YAN Yong-Ping,SU Hai-Xia,WANG An-Hui,ZHANG Lei,ZHANG Jing-Xia,MEN Ke,XU De-Zhong.A cell culture system transfected with full-length DNA clone of hepatitis B virus[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2006,27(12):1130-1133. |
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| Authors: | ZHAO Yan-Fang YAN Yong-Ping SU Hai-Xia WANG An-Hui ZHANG Lei ZHANG Jing-Xia MEN Ke XU De-Zhong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hepatitis B virus genome viral cloning moleculor transfection cell culture gene expression |
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