PGC-1α-shRNA慢病毒载体对牙髓干细胞分化的影响

目的：构建过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α（peroxisome proliferators activated receptor γ coactivator 1α,PGC-1α）短发夹RNA（short hairp in RNA,shRNA）慢病毒表达载体,体外评价其对牙髓干细胞（dental pulp stem cells,DPSC）分化的影响。方法：根据shRNA设计原则,设计合成用于体内干扰PGC-1α编码序列的shRNA,重组入慢病毒载体PLKO.1。将构建正确的PLKO.1/PGC-1α-shRNA感染DSPC,实时荧光定量PCR检测PGC-1α的表达,细胞化学染色和实时荧光定量PCR检测其对DPSC分化的影响。结果：测序证实重组质粒构建成功;体外试验表明,DPSC转染了PGC-1α-shRNA后PGC-1α表达水平降低,干扰效率达81%,而且细胞钙化结节增多,牙本质涎磷蛋白和Ⅰ型胶原的表达明显上调,与对照组相比具有显著性差异（P〈0.05）。结论：慢病毒介导的PGC-1α-shRNA成功在体外抑制了目的基因的表达,并影响牙髓干细胞的分化。