pEGFP—N1-Snail真核表达质粒的构建与表达 |
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引用本文: | 朱丽芳,宁天云,杨聪翀,王子露,宋晓陵,刘来奎.pEGFP—N1-Snail真核表达质粒的构建与表达[J].中国医学文摘:口腔医学,2011(3):117-119. |
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作者姓名: | 朱丽芳 宁天云 杨聪翀 王子露 宋晓陵 刘来奎 |
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作者单位: | [1]南京医科大学口腔医学研究所,江苏南京210029 [2]南京医科大学附属口腔医院基础教研室,江苏南京210029 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(30872903) |
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摘 要: | 目的:构建pEGFP—N1-Snail真核表达质粒,并进行鉴定,转染SCC25肿瘤上皮细胞,检测其表达。方法:利用RT—PCR方法从SCC9肿瘤上皮细胞中提取Snail基因片段,与pMD18-T载体连接,构建pMD18-T—Snail重组质粒,挑选阳性克隆,PCR鉴定后送测序。重组质粒双酶切后与pEGFP—N1真核表达载体连接,构建pEGFP—N1-Snail真核表达质粒,进行测序、酶切鉴定,表明质粒构建成功。分别抽提pEGFP—N1及pEGFP—N1-Snail质粒,用脂质体2000转染SCC25肿瘤上皮细胞,RT.PCR检测Snail在该细胞中表达。结果:本实验成功构建了pEGFP—N1—Snail真核表达质粒,并在SCC25肿瘤上皮细胞中表达。结论:本实验结果为进一步研究Snail作为转录抑制因子诱导上皮间质转化提供实验基础。
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关 键 词: | 口腔黏膜鳞癌 pEGFP—N1 Snail 基因 |
Construction and expression of the eukaryotic expression vector pEGFP-N1-Snail |
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Authors: | ZHU Li-fang NING Tian-yun YANG Cong-chong WANG Zi-lu SONG Xiao-ling LIU Lai-kui |
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Institution: | 1. Institute of Stomatology, Nanjing Medical University, Nanjing 210029, China ;2. Department of Basic Science of Stomatology, College of Stomatology, Nanjing Medical University, Nanfing 210029, China) |
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Abstract: | |
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Keywords: | Oral squamous cell carcinoma pEGFP-N1 Snail Gene |
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