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pEGFP—N1-Snail真核表达质粒的构建与表达
引用本文:朱丽芳,宁天云,杨聪翀,王子露,宋晓陵,刘来奎.pEGFP—N1-Snail真核表达质粒的构建与表达[J].中国医学文摘:口腔医学,2011(3):117-119.
作者姓名:朱丽芳  宁天云  杨聪翀  王子露  宋晓陵  刘来奎
作者单位:[1]南京医科大学口腔医学研究所,江苏南京210029 [2]南京医科大学附属口腔医院基础教研室,江苏南京210029
基金项目:国家自然科学基金(30872903)
摘    要:目的:构建pEGFP—N1-Snail真核表达质粒,并进行鉴定,转染SCC25肿瘤上皮细胞,检测其表达。方法:利用RT—PCR方法从SCC9肿瘤上皮细胞中提取Snail基因片段,与pMD18-T载体连接,构建pMD18-T—Snail重组质粒,挑选阳性克隆,PCR鉴定后送测序。重组质粒双酶切后与pEGFP—N1真核表达载体连接,构建pEGFP—N1-Snail真核表达质粒,进行测序、酶切鉴定,表明质粒构建成功。分别抽提pEGFP—N1及pEGFP—N1-Snail质粒,用脂质体2000转染SCC25肿瘤上皮细胞,RT.PCR检测Snail在该细胞中表达。结果:本实验成功构建了pEGFP—N1—Snail真核表达质粒,并在SCC25肿瘤上皮细胞中表达。结论:本实验结果为进一步研究Snail作为转录抑制因子诱导上皮间质转化提供实验基础。

关 键 词:口腔黏膜鳞癌  pEGFP—N1  Snail  基因

Construction and expression of the eukaryotic expression vector pEGFP-N1-Snail
Authors:ZHU Li-fang  NING Tian-yun  YANG Cong-chong  WANG Zi-lu  SONG Xiao-ling  LIU Lai-kui
Institution:1. Institute of Stomatology, Nanjing Medical University, Nanjing 210029, China ;2. Department of Basic Science of Stomatology, College of Stomatology, Nanjing Medical University, Nanfing 210029, China)
Abstract:
Keywords:Oral squamous cell carcinoma  pEGFP-N1  Snail  Gene
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