| Livin shRNA表达载体的构建及其稳定转染宫颈癌siha细胞系的建立 |
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| 引用本文： | 于利利,王泽华. Livin shRNA表达载体的构建及其稳定转染宫颈癌siha细胞系的建立[J]. 华中科技大学学报(医学版), 2009, 38(4). DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2009.04.022 |
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| 作者姓名： | 于利利 王泽华 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科,武汉,430022 |
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| 基金项目： | 湖北省自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建Livin shRNA真核表达载体,获得干扰质粒稳定转染的宫颈癌siha细胞系.方法 合成Livin基因干扰序列并定向插入到RNA干扰(RNAi)真核表达载体pGenesil-1质粒,通过测序进行鉴定.干扰质粒经脂质体Lipofectamine 2000介导转染siha细胞.经G418持续压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系.RT-PCR检测所筛选克隆Livin mRNA的转录水平.结果 测序证明Livin干扰序列及读码框完全止确,干扰质粒稳定转染的siha细胞在倒置荧光显微镜下呈明亮绿色荧光.RT-PCR结果显示Livin shRNA序列对Livin mRNA有较好的抑制效果.结论 成功构建了Livin shRNA真核表达载体,Livin shRNA质粒稳定转染的siha细胞系的建芷为进一步研究Livin在官颈癌细胞中的作用奠定了基础.
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| 关 键 词： | Livin基因 RNA干扰 转染 siha细胞 |
Construction of shRNA Expression Vectors of Livin and Establishment of Their Stably Transfected Cell Lines |
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| Yu Lili,Wang Zehua. Construction of shRNA Expression Vectors of Livin and Establishment of Their Stably Transfected Cell Lines[J]. Journal of Huazhong University of Science and Technology(Health Sciences), 2009, 38(4). DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2009.04.022 |
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| Authors: | Yu Lili Wang Zehua |
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