| 人抗菌肽HBD-2的原核表达及其多克隆抗体的制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 王国兴,冯云,吴琦,阎蓉华,李洵,王伯瑶,黄宁.人抗菌肽HBD-2的原核表达及其多克隆抗体的制备与鉴定[J].生物医学工程学杂志,2005,22(3):575-579. |
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| 作者姓名： | 王国兴 冯云 吴琦 阎蓉华 李洵 王伯瑶 黄宁 |
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| 作者单位： | 四川大学华西医学中心,感染免疫研究室,成都,610041 |
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| 基金项目： | CMB资助项目(98-681)，国家自然科学基金资助项目(39970293) |
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| 摘 要： | 制备人β-防御素2(HBD-2)多克隆抗体,以用于HBD-2蛋白水平表达的检测。提取人肠腺上皮细胞株Caco-2总RNA,设计引物,应用RT-PCR从其总RNA中扩增HBD-2成熟肽cDNA片段,以pGEX-1λT为载体,构建原核表达质粒pGEX-1λT-HBD-2。大肠杆菌裂解物经亲合层析纯化后获得分子量约30kDa的融合蛋白,将此融合蛋白免疫新西兰兔,并用正辛酸-硫酸铵分步沉淀法初步纯化抗血清,ELISA法显示抗血清对HBD-2的效价为1∶12800,Western印迹显示抗血清可识别HBD-2。本实验结果证明应用重组融合小肽代替白蛋白或甲状腺-肽偶联免疫可获得其高效价的识别HBD-2的多克隆抗体,为今后从蛋白质水平研究HBD-2基因的诱导表达,包括组织分布和基因表达调控等研究打下了基础。
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| 关 键 词： | HBD-2 基因重组 融合蛋白 多克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2004-03-29 |
| 修稿时间： | 2004-03-292004-05-21 |
Production of Polyclonal Antibody Against HBD-2 by Immunization with Recombinant GST-HBD-2 Fusion Protein |
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| Wang Guoxing,Feng Yun,Wu Qi,Yan Ronghua,Li Xun,Wang Boyao,Huang Ning.Production of Polyclonal Antibody Against HBD-2 by Immunization with Recombinant GST-HBD-2 Fusion Protein[J].Journal of Biomedical Engineering,2005,22(3):575-579. |
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| Authors: | Wang Guoxing Feng Yun Wu Qi Yan Ronghua Li Xun Wang Boyao Huang Ning |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HBD-2 Recombinant prokaryotic construct GST-HBD-2 fusion protein Polyclonal antibody |
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