| 人胰岛淀粉样多肽沉淀细胞模型的体外构建 |
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| 引用本文： | 徐佳,张宏利,骆天红,田景琰,李果.人胰岛淀粉样多肽沉淀细胞模型的体外构建[J].上海交通大学学报(医学版),2007,27(3):271-274. |
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| 作者姓名： | 徐佳 张宏利 骆天红 田景琰 李果 |
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| 作者单位： | 上海交通大学医学院瑞金医院上海市内分泌代谢病研究所 上海200025 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;上海市教委资助项目;上海交通大学校科研和教改项目 |
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| 摘 要： | 目的构建人胰岛淀粉样多肽(hIAPP)基因真核表达载体,并在无内源性IAPP表达的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株上进行体外表达实验,建立可产生hIAPP沉淀的细胞模型。方法应用RT-PCR技术扩增得到hIAPP cDNA,将其克隆至真核表达质粒pcDNA3.1( )中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1( )-IAPP;随后用lipofectamine 2000介导转染CHO细胞,以RT-PCR法检测重组质粒在mRNA水平的表达,以Thiaflavin S染色的方法检测重组质粒在蛋白水平的表达。结果构建的pcDNA 3.1-hIAPP真核表达体系成功转染体外培养的CHO细胞,目的基因在mRNA水平和蛋白水平均有表达,转染后培养48 h内的CHO细胞用Thioflavin S染色,与阴性对照相比较,证实有hIAPP的表达而导致细胞内淀粉样沉积发生。结论构建了hIAPP真核表达质粒,并成功在体外表达,从而建立了可产生IAPP淀粉样沉淀的体外哺乳动物细胞模型,为进一步研究胰岛淀粉样沉积的发病机制提供了良好的平台。
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| 关 键 词： | 胰岛淀粉样多肽 基因克隆 真核表达载体 |
| 文章编号： | 0258-5898（2007）03-0271-04 |
| 修稿时间： | 2006-07-13 |
Construction of human islet amyloid polypeptide expression vector |
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| XU Jia,ZHANG Hong-li,LUO Tian-hong,TIAN Jing-yan,LI Guo.Construction of human islet amyloid polypeptide expression vector[J].Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science,2007,27(3):271-274. |
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| Authors: | XU Jia ZHANG Hong-li LUO Tian-hong TIAN Jing-yan LI Guo |
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| Institution: | Shanghai Institute of Endocrinology and Metabolism, Ruijin Hospital, School of Medicine, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200025, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | islet amyloid polypeptide gene cloning eukaryotic expression vector |
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