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靶向ERCC1 RNA干扰对人肺腺癌细胞顺铂耐药的逆转
引用本文:夏莹,胡成平,张梅春,杨红忠,杨华平,周东波.靶向ERCC1 RNA干扰对人肺腺癌细胞顺铂耐药的逆转[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2007,14(6):531-535.
作者姓名:夏莹  胡成平  张梅春  杨红忠  杨华平  周东波
作者单位:1. 中南大学湘雅医院,呼吸科,长沙,410008;长沙市中心医院,胸科,长沙,410004
2. 中南大学湘雅医院,呼吸科,长沙,410008
3. 广州市第一人民医院,呼吸科,广州,510180
基金项目:湖南省自然科学基金资助项目(No.06jj4023)~~
摘    要:目的:探讨利用RNA干扰技术切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-completion gene 1,ERCC1)逆转耐顺铂(cisplatin,CDDP)人肺腺癌细胞A549/CDDP的耐药性。方法:(1)常规体外培养A549/CDDP细胞,以脂质体包裹的ERCC1-siRNA转染细胞,转染浓度分别为100、200、300 nmol/L,并设空白转染、Lip转染对照组,观察转染效果。(2)采用免疫组化SABC法及RT-PCR法分别检测肿瘤细胞转染siRNA后ERCC1基因和蛋白的表达。(3)MTT法检测肿瘤细胞耐药指数,观察ERCC1靶向siRNA逆转A549/CDDP细胞顺铂耐药的效果。结果:(1)Lip组、siRNA-neg组转染效率分别为(56.38±9.82)%、(63.54±4.87)%,SiRNA-ERCC1①组、siRNA-ERCC1②组、siRNA-ERCC1③组转染效率分别为(43.62±6.08)%、(65.85±9.61)%和(78.93±4.86)%。(2)针对ERCC1的siRNA转染A549/CDDP后,细胞ERCC1 mRNA及蛋白表达均下调,siRNA-ERCC1(300 nmol/L)组效应最强,分别下降至(11.19±6.82)%和(20.88±6.57)%(P<0.01)。(3)A549/CDDP细胞转染后耐药倍数减为6.05、4.64、2.94,空载体对照组细胞的耐药倍数为9.6。结论:RNA干扰技术封闭ERCC1基因可较大程度逆转耐顺铂人肺腺癌细胞的耐药性,且呈一定的浓度依赖性;ERCC1基因可作为逆转肺癌耐药治疗的有效靶点。

关 键 词:肺癌细胞  顺铂耐药  逆转  修复交叉互补基因1  RNA干扰
文章编号:1007-385X(2007)06-0531-05
收稿时间:2007-08-20
修稿时间:2007-10-29

ERCC1 targeted RNA interference reversing cisplatin resistance in human lung adeno-carcinoma cells
XIA Ying,HU Cheng-ping,ZHANG Mei-chun,YANG Hong-zhong,YANG Hua-ping and ZHOU Dong-bo.ERCC1 targeted RNA interference reversing cisplatin resistance in human lung adeno-carcinoma cells[J].Chinese Journal of Cancer Biotherapy,2007,14(6):531-535.
Authors:XIA Ying  HU Cheng-ping  ZHANG Mei-chun  YANG Hong-zhong  YANG Hua-ping and ZHOU Dong-bo
Abstract:
Keywords:lung neoplasm cells  drug resistance to cisplatin  reversion  excision repair cross-completion gene 1  RNA interfering
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