鞘内注射miR-212反义锁核酸对骨癌小鼠痛行为的影响

目的研究骨癌痛发展和维持过程中小鼠脊髓水平miR-212表达的变化规律及连续鞘内注射miR-212反义锁核酸LNA．anti—miR-212对骨癌痛小鼠痛行为的影响。方法本实验分为两个部分：（一）骨癌痛小鼠脊髓水平miR-212表达的变化规律：C3H／HeJ雄性小鼠36只,随机分为假手术组（sham组,n=18）和肿瘤组（T组,n=18）。sham组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔注射不含肿瘤细胞的仪一MEM,T组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔注射纤维肉瘤细胞NCTC2472,建立骨癌痛模型。在术前1d,术后4d、7d、10d、14d、21d,sham组和T组各随机取三只小鼠处死,取脊髓腰膨大标本,用Real-timePCR的方法检测脊髓水平miR一212的表达情况。（二）连续鞘内注射LNA—anti-miR-212对骨癌痛小鼠痛行为的影响：C3H／HeJ雄性小鼠24只,随机分为四组：L组（鞘内注射LNA-anti—miR一212,n=6）、L’组（鞘内注射LNA＇-negativecontrol,n=6）、C组（鞘内注射溶媒无核酸酶水,n=6）和S组（假手术处理,n=6）。L组、L’组和C组小鼠在右侧股骨远端注射纤维肉瘤细胞NCTC2472,S组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔注射不含肿瘤细胞的仪一MEM。所有小鼠于术前1d、术后4d、7d、10d、14d测小鼠痛行为指标,包括自发抬足次数和机械缩足阈值（PWMT）,术后14d,L组、L’组、C组小鼠分别鞘内注射LNA—anti—miR-21212pmol／5山、LNA＇-negativecontrol12pmol／5I＊1和无核酸酶水5I＊1,连续鞘内注射7d,1次／d,每天测小鼠痛行为指标,至术后第21天。结果miR-212的表达变化表现为：与基础值相比,sham组和T组小鼠在术后第4天,脊髓水平miR一212明显升高（P〈0．05）;与基础值和sham组相比,T组小鼠脊髓水平miR-212在术后7d、10d、14d、21d均明显升高（P〈0．05）。连续鞘内注射LNA—anti—miR-212改善骨癌痛小鼠痛行为：术后19d至21d,与L’组和c组相比,L组小鼠PWMT[19d（1．07-4-0．16）g,20d（1．13±0．21）g,21d（1．27±0．21）g）]明显升高（P〈0．05）,自发抬足次数明显降低[19d（6．674-1．04）,20d（6．62±1．39）,21d（6．47±1．17）]（P〈0．05）。与14d给药前相比,L组小鼠术后19d至21d的PWMT明显升高（P〈0．05）,自发抬足次数明显降低（P〈0．05）。结论骨癌痛发展过程中,脊髓水平miR-212表达量升高。连续鞘内注射LNA-anti—miR一212可以缓解骨癌小鼠痛行为。