NF-κB通路在单核细胞诱导肾小管上皮细胞转分化中的作用 |
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引用本文: | 李青,吕林莉,郑敏,马坤岭,张晓良,刘必成.NF-κB通路在单核细胞诱导肾小管上皮细胞转分化中的作用[J].中华肾脏病杂志,2011,27(11):825-830. |
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作者姓名: | 李青 吕林莉 郑敏 马坤岭 张晓良 刘必成 |
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作者单位: | DOI:10.3760/cma.j.issn.1001-7097.2011.11.008基金项目:国家自然科学基金(81130010);江苏省自然科学基金(BK2011061);江苏省高校研究生科研创新计划(cx09B_065Z)作者单位:210009南京,东南大学附属中大医院肾脏科 东南大学肾脏病研究所通信作者:刘必成,Email:liubc64@yahoo.com.cn |
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基金项目: | 国家自然科学基金,江苏省自然科学基金,江苏省高校研究生科研创新计划 |
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摘 要: | 目的 观察单核细胞(U937细胞)对人近端肾小管上皮细胞(HK-2细胞)转分化的影响及其分子机制。 方法 将HK-2细胞与人单核细胞系U937细胞共培养;倒置相差显微镜观察HK-2细胞形态;Western印迹、实时荧光定量PCR法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤连蛋白(FN)、E钙黏蛋白(E-cadherin)和胞间黏附分子1(ICAM-1)表达;BCECF-AM荧光染色法测定单核细胞黏附;流式细胞仪法检测HK-2细胞表面分子ICAM-1表达;基因芯片筛选HK-2细胞基因变化;利用信号阻断剂阻断基因芯片筛选出的信号通路,进一步验证单核细胞诱导肾小管上皮细胞转分化的分子机制。 结果 单核细胞可直接诱导HK-2细胞发生形态变化,减少HK-2细胞E-cadherin表达(均P < 0.05),并上调α-SMA、FN表达(均P < 0.05)。应用CD18抗体阻断CD18-ICAM-1可抑制单核细胞黏附及其诱导的HK-2细胞形态变化。基因芯片结果显示,NF-κB信号通路分子CC亚族趋化因子配体20(CCL20)、白细胞介素(IL)2、IL-8、脂磷壁酸(LTA)及血小板内皮细胞黏附分子1(PECAM1)表达明显增加(均P < 0.05)。NF-κB信号阻断剂吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)能显著抑制HK-2细胞形态变化及表面ICAM-1表达,抑制单核细胞诱导的肾小管上皮细胞转分化。 结论 单核细胞通过CD18分子与HK-2细胞表面ICAM-1结合,从而启动NF-κB信号通路介导的特定基因转录,最终导致肾小管上皮细胞发生转分化。
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关 键 词: | 单核细胞 NF-κB 抗原CD18 胞间黏附分子1 上皮间充质转分化 |
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