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一种靶向HER2嵌合抗原受体CAR THP-1细胞系的构建
引用本文:陈义昭,刘丽华,朱向玲,王卉卉,吴旭铭,檀学文,方亦龙,蒋海峰,许振,魏伟,涂佳杰.一种靶向HER2嵌合抗原受体CAR THP-1细胞系的构建[J].安徽医科大学学报,2023(3):352-357.
作者姓名:陈义昭  刘丽华  朱向玲  王卉卉  吴旭铭  檀学文  方亦龙  蒋海峰  许振  魏伟  涂佳杰
作者单位:安徽医科大学临床药理研究所抗炎免疫药物教育部重点实验室抗炎免疫药物安徽协同创新中心
基金项目:国家自然科学基金(编号:31900616);;安徽省教育厅科学研究项目(编号:YJS20210292);
摘    要:目的 获得稳定转染靶向人类表皮生长因子2(HER2)的嵌合抗原受体巨噬细胞(CAR-M)。方法 构建靶向HER2的CAR慢病毒载体并感染人单核细胞白血病细胞系(THP-1)。通过分选流式细胞仪分选出含有绿色荧光标记的CAR THP-1细胞并在体外继续培养。将此靶向HER2的CAR THP-1细胞与HER2表达阴性(-)及阳性(+)的子宫内膜癌细胞系Ishikawa分别共培养,通过成像流式细胞仪检测其对HER2表达阳性肿瘤细胞的靶向吞噬,通过流式细胞仪检测其对HER2表达阳性肿瘤细胞的靶向吞噬比例。结果 CAR慢病毒感染THP-1细胞效率较低;与癌细胞共培养后,流式细胞术及成像流式细胞术结果显示,CAR THP-1组与空载体组相比,CAR THP-1细胞对HER2阳性的Ishikawa细胞吞噬能力增强(P<0.01)。结论 通过构建CAR慢病毒载体并转染THP-1细胞,成功建立了靶向HER2的CAR THP-1细胞系,且其能通过特异性靶向吞噬HER2阳性Ishikawa细胞。

关 键 词:嵌合抗原受体巨噬细胞  肿瘤细胞  吞噬  慢病毒
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