HBV-DNA-YMDD耐药突变检测的临床应用

目的检测慢性乙型活动性肝炎患者在使用拉米夫定抗病毒治疗过程中,是否发生了HBV-DNA—YMDD变异。方法采用限制性片段长度多态性法(RFLP);通过PCR扩增目的DNA片段,再用限制性内切酶(NdeI)酶切,琼脂糖凝胶电泳,在紫外透射仪上观察酶切后PCR产物条带的变化进行多态性分析,即可确定是否发生了变异。结果52例患者HBV-DNA定量均>1.0×103,其中检岀HBV-YMDD变异15例,检岀率为28.8%。用药54周、81周、132周变异率分别为12.5%、23%、35%。HBV-YMDD变异者ALT均>320U/L;HBV-DNA荧光定量均大于107。结论服用拉米夫定时间越长,YMDD变异率越高。采用RFLP-PCR法能快速、简便灵敏地检岀HBV-YMDD变异。