水通道蛋白9商品化抗体和自制抗体识别位点的分析和应用 |
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作者姓名: | 程全成 丁慧如 王子元 方金玉 张晓丽 张卫光 |
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作者单位: | 1.北京大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系,北京 100191;2.北京卫生职业学院医学基础教研室,北京 102402 |
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基金项目: | 北京市自然科学基金 7162098 |
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摘 要: | 目的 分析水通道蛋白9 (AQP9)商品化抗体和自制抗体的抗原识别位点,并鉴别其应用效果。方法 利用Western blotting对比3种商品化抗体与自制AQP9抗体鉴定基因型的效果。分析4种抗体的抗原识别位点,及其在实际应用中的特异性。结果 Western blotting结果显示,3种商品化抗体在野生型(WT)和Aqp9-/-小鼠中均可见蛋白条带。3种商品化抗体对应的血蓝蛋白(KLH)共轭合成肽依次为大鼠、人源和人源,与小鼠AQP9氨基酸序列存在一定差异。AQP3/7与AQP9分子量相近,且在肝中均有表达,同源性较高。自制抗体在WT鼠的27 kD位置可见一明显条带,但是Aqp9-/-鼠的相应位置未见条带。结论 1号和3号商品化抗体可用于辅助鉴别Aqp9-/-鼠的基因型,自制抗体在蛋白水平上可以准确鉴定基因型。
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关 键 词: | 水通道蛋白9 肝脏 抗体 基因敲除 免疫印迹法 小鼠 大鼠 人 |
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