人RUVBL2真核表达载体的构建及其在HeLa细胞中的表达 |
| |
引用本文: | 郑英,谢林俊,张露萍,王海燕,孙红亚,梁虹,贾筱琴,胡艳秋.人RUVBL2真核表达载体的构建及其在HeLa细胞中的表达[J].细胞与分子免疫学杂志,2012(6):586-587,591. |
| |
作者姓名: | 郑英 谢林俊 张露萍 王海燕 孙红亚 梁虹 贾筱琴 胡艳秋 |
| |
作者单位: | 扬州大学医学院组织学与胚胎学教研室;扬州大学医学院病理学教研室;扬州大学临床医学院生殖医学中心 |
| |
基金项目: | 国家自然科学基金(31071020,81000272);江苏省自然科学基金(BK2009192) |
| |
摘 要: | 目的:构建带有绿色荧光蛋白的RUVBL2真核表达载体pEGFP-N1-RUVBL2,并鉴定其在HeLa细胞中的表达。方法:以pGADT7-RUVBL2质粒为模板,PCR扩增RUVBL2基因,首先克隆至T载体中,进一步亚克隆至p-EGFP-N1,并对重组表达载体进行酶切及测序鉴定。采用脂质体转染法将重组质粒瞬时转染HeLa细胞系,应用荧光显微镜观察绿色荧光融合蛋白的表达,并用Western blot法检测RUVBL2-GFP融合蛋白的表达。结果:经限制性酶切鉴定及测序分析证实pEGFP-N1-RUVBL2载体序列正确;荧光显微镜下可见转染的HeLa细胞中有绿色荧光蛋白的表达,Western blot法证实转染细胞中能表达RUVBL2-GFP融合蛋白。结论:pEGFP-N1-RU-VBL2表达载体构建成功,并在HeLa细胞内成功表达。
|
关 键 词: | RUVBL2基因 真核表达载体 转染 HeLa细胞 |
本文献已被 CNKI 等数据库收录! |
|