非小细胞肺癌p16/CDKN2基因失活的研究

目的：分析中国人非小细胞肺癌中p16／CDKN2基因失活的情况,探讨该基因在肺癌发生中的作用。方法：选取与p16基因紧密连锁的D9S1748位点,对17例临床切除的原发性肺癌标本进行微卫星不稳定性分析,用甲基化特异性PCR（methylation-specific PCR,MSP)检测p16基因启动子区CpG岛甲基化状况,用免疫组织化学法检测P16蛋白表达情况。结果：微卫星不稳定性分析结果表明,在13例D9S1748位点存在多态性的肿瘤DNA中有9例（69．2％）发生了杂合性缺失（loss of heterozygosity,LOH)。MSP的结果显示,有70．6％（12／17）的肿瘤组织存在p16启动子区的异常高基甲基。在本研究中,82．4％（14／17）的肿瘤组织可以检测出一种或两种p16基因的异常改变。对此17例肿瘤标本进行的免疫组织化学分析显示,有13例P16蛋白表达阴性,其中92．3％（12／13）存在一种或两种p16基因的异常改变。免疫组化结果与p16基因分子遗传学改变情况基本吻合。结论：作为一种抑癌基因,p16在多种肿瘤组织中都有异常改变。我们的研究表明,p16基因失表达是非小细胞肺癌中较常见的事件;在这里,杂合性缺失和异常甲基化引起的基因表达沉默为其主要失活机制。