丁内酯-Ⅰ对小鼠卵母细胞体外成熟、染色质构型和超微结构的影响

目的观察100μmol／L丁内酯-Ⅰ（BL—I）对小鼠卵母细胞的体外成熟、染色质构型及超微结构的影响。方法实验组小鼠未成熟卵用“两步法”培养，先用BL-Ⅰ培养液培养6h，然后再用成熟培养液培养；对照组直接用成熟培养液培养，观察其生发泡破裂（GVBD）和第一极体形成的过程。将BL-Ⅰ培养液培养6h前后的卵母细胞分别固定行Hochest33342染色及制作电子显微镜标本，比较染色质构型及超微结构的变化。结果BL—Ⅰ培养液培养小鼠未成熟卵6h，实验组卵母细胞GVBD的发生率（21．5％）明显低于对照组（82．3％）（P=0．001）。BL-Ⅰ的抑制作用消除后，实验组卵母细胞GVBD发生率（96．9％）和成熟率（86．1％）与对照组（分别为97．3％和83．3％）无差异，但GVBD和成熟过程明显加速。BL-Ⅰ抑制卵母细胞核成熟6h，部分卵母细胞（32．8％）的染色质凝集，染色质围绕核仁型（SN）和非围绕核仁型（NSN）卵母细胞的比例（50．8％和16．4％）较培养前（69．2％和30．8％）明显下降；卵丘颗粒细胞的伸展未受影响，卵母细胞胞质的超微结构未出现明显异常，皮质颗粒和线粒体的形态及分布与对照组相似。结论BL—Ⅰ能可逆性抑制体外培养的小鼠卵母细胞的核成熟，抑制作用消除后，卵母细胞成熟能力不受影响，但GVBD和第一极体的形成过程明显加速；在BL-Ⅰ抑制卵母细胞核成熟的过程中，染色质构型发生变化，部分NSN型转化为发育能力更高的SN型，而胞质的超微结构未出现明显异常，有待进一步研究。

The effect of butyrolactone-I on in vitro maturation, chromatin configuration and ultrastructure of mouse oocytes