用于大容量噬茵体抗体库的表达载体的构建及鉴定

目的：构建一个适用于大容量抗体库的噬菌体抗体表达载体。方法：通过插入人工合成寡核苷酸、PCR介导的定位突变等技术，将载体p3MH进行改造，使之更适于构建大容量抗体库。通过噬茵体抗体的表达、ELISA及细胞内重组试验鉴定所获得的表达载体。结果：通过插入loxp511和1oxp序列，将Lac启动子更换为阿拉伯糖启动子、改造抗体基因克隆位点等，将p3MH改造成pAL。经检测pAL可以表达具有功能的Fab噬菌体抗体，其表达调控更为严密，可以在cre^ 细菌胞内发生预期的loxp-cre介导的定位重组。结论：所获得的表达载体pAL适用于构建大容量Fab噬菌体抗体库。