| 幽门螺杆菌Catalas/GST融合蛋白的可溶性表达及凝血酶柱上切割GST标签 |
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| 引用本文： | 李妍,姜茵,奚月,何殿殿,宁云山.幽门螺杆菌Catalas/GST融合蛋白的可溶性表达及凝血酶柱上切割GST标签[J].现代预防医学,2012,39(21):5614-5616,5619. |
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| 作者姓名： | 李妍 姜茵 奚月 何殿殿 宁云山 |
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| 作者单位： | 南方医科大学生物技术学院生物治疗研究所,广州,510515 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目(31070119);广东省自然科学基金自由申请项目(S2011010006070) |
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| 摘 要： | 目的 利用GST融合基因表达系统表达幽门螺杆菌Catalase/GST融合蛋白,并利用凝血酶柱上切割GST标签.方法 将重组表达质粒Catalase/pGEX-4T-1转化大肠杆菌BL21 (DE3)感受态中并用IPTG进行诱导表达,菌体经反复冻融、溶菌酶裂解及超声破菌进行裂解.采用谷胱甘肽琼脂糖树脂Glutathione Sepharose 4B对Catalase/GST融合蛋白可溶性表达上清进行纯化,并同时利用凝血酶柱上切割GST标签,用鼠抗Catalase抗体对纯化产物进行Western blot鉴定.结果 高效表达出相对分子质量约85 kDa的Catalase/GST融合蛋白,以部分可溶性的形式表达,凝血酶柱上成功地切割了GST标签,Catalase蛋白能被鼠抗Catalase单克隆抗体识别.结论 成功表达了Catalase/GST融合蛋白并柱上切割了GST标签,为深入研究Catalase的功能奠定了基础.
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| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 Catalase 融合表达 GST标签 切割 |
Soluble expression of Catalase /GST fusion protein of helicobacter pylori and thrombin cleavage of GST tag on column |
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| LI Yan,JIANG Yin,XI Yue,HE Dian-dian,NING Yun-shan.Soluble expression of Catalase /GST fusion protein of helicobacter pylori and thrombin cleavage of GST tag on column[J].Modern Preventive Medicine,2012,39(21):5614-5616,5619. |
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| Authors: | LI Yan JIANG Yin XI Yue HE Dian-dian NING Yun-shan |
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| Institution: | .Biotechnology School,Southern Medical University,Guangzhou,Guangdong 510515,China |
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