前处理方法和外源性物质对含β-HgS药物中甲基汞检测假阳性结果的影响研究

目的:探索前处理方法和外源性物质对药物中β-硫化汞(β-Hg S)转化为甲基汞带来的影浓度、物理浸萃前处理手段和外源性物质对β-Hg S转化为甲基汞的影响,采用高效液相色谱与冷蒸气-原子荧光光谱法(HPLC-CV-AFS)在线耦合测定甲基汞。色谱柱为Agilent Eclipse Plus C₁₈柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以甲醇-0.06 mol·L^-1乙酸铵溶液(含0.1%L-半胱氨酸)(5∶95)为流动相,流速1 mL·L^-1,进样体积100μL,检测波长254 nm。结果:15 mgβ-Hg S经超纯水前处理后,测得甲基汞浓度低于检测下限;经5 mol·L^-1盐酸或25%氢氧化钾-甲醇溶液分别前处理后,发现有β-Hg S转化为甲基汞,甲基汞质量浓度为(0.63±0.01)μg·L^-1和(2.32±0.07)μg·L^-1,占可溶性汞的比值分别为0.067%和1.162%;β-Hg S经加热法前处理后,转化甲基汞质量浓度为(0.71±0.03)μg·L^-1,显著高于振荡法(0.52±0.02)μg·L^-1]和超声法(0.61±0.01)μg·L^-1],3种物理浸萃方法的甲基汞占可溶出汞比值无显著性差异,分别为0.059%、0.061%和0.062%;盐酸浓度为0.5~5.0 mol·L^-1时,测得甲基汞质量浓度为(0.52±0.02)~(0.63±0.04)μg·L^-1(占可溶性汞的比值为0.454%~0.069%),8 mol·L^-1盐酸浓度下甲基汞的浓度显著升高为(1.50±0.08)μg·L^-1(占可溶性汞的比值为0.018%);与β-Hg S对照组甲基汞浓度(0.64±0.02)μg·L^-1,占可溶性汞的比值为0.069%]相比,加入纤维素和植物混合组分后甲基汞浓度为(0.76±0.03)μg·L^-1和(1.44±0.07)μg·L^-1,占可溶性汞的比值分别为0.070%和0.114%。结论:本研究表明,当样品中存在较高含量β-Hg S(≥15 mg)时,在5 mol·L^-1盐酸或25%氢氧化钾-甲醇溶液做前处理溶剂的条件下,β-Hg S经前处理后会转化为甲基汞,转化的甲基汞浓度与酸浓度呈正相关,加热能够促进甲基化的发生,某些外源性物质如纤维素等可促进高含量β-Hg S样品转化为甲基汞。