PCR-SSCP作HLA-DRB基因分型的初步研究 |
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作者姓名: | 林观平 杨英浩 孙筱放 伍新尧 罗超权 刘煦文 张仕光 |
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作者单位: | 中山医科大学生化教研室,广州市第二人民医院 |
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基金项目: | 卫生部和美国中华医学基金 |
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摘 要: | 从20例人类白细胞抗原-DR(HLA-DR)血清学特异性不同的血痕样本中抽提基因组DNA,经PCR扩增HLA-DRB基因第二外显子的高度多态区域。PCR产物在50%甲酰胺存在下加性获得单链DNA片段后,经8%中性聚丙用酰胺凝胶电泳、银染显色分析。结果显示,DR血清学特异性不同的个体具有不同的电泳图型。而DR相同血清不同的个体却具有相同的电泳带型。在稳定条件下,单链电泳图型有着良好的重复性。与聚合酶链反应-制性片段长度多态性(PCR-RFLP)或聚合酶链反应-序列特异寡核苷酸(PCR-SSO)探针法相比,聚合酶链反应。单链构象多态性(PCR-SSCP)分析简单、快速、经济,不需探针和限制性内切酶,并可望成为临床上器官和骨髓移植寻找合适的HLA配型的一种工具。
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关 键 词: | 聚合酶链反应-单链构象多态性,人类白细胞抗原,基因,基因分型 |
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