SOCS1、SHP1在JAK2V617F突变阳性骨髓增殖性肿瘤中的表达及鲁索替尼的调控作用

目的 研究JAK2V617F突变阳性骨髓增殖性肿瘤（MPN）组织中JAK2V617F突变量与磷酸化Janus激酶2（p-JAK2）、细胞因子信号转导抑制蛋白1（SOCS1）、含SH2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶1（SHP1）表达的关系，并探讨JAK2抑制剂鲁索替尼（ruxolitinib）对JAK2V617F突变阳性人红白血病细胞系HEL细胞的增殖和HEL细胞中SOCS1、SHP1表达的影响。方法 纳入2012年7月至2016年8月于河北省人民医院和保定市第一医院就诊的48例JAK2V617F突变阳性的MPN患者为MPN组，同期24例贫血患者为对照组。采用免疫组织化学法检测骨髓组织标本中p-JAK2、SOCS1和SHP1的蛋白表达水平。SOCS1、SHP1蛋白表达量与JAK2V617F突变量的相关分析采用Spearman等级相关分析。用不同浓度（50、100、250、500、1 000 nmol/L）的鲁索替尼处理HEL细胞后，采用CCK-8法检测HEL细胞的活力，qPCR法检测MPN组织和HEL细胞中JAK2V617F突变量以及HEL细胞中JAK2、SOCS1、SHP1 mRNA表达水平，蛋白质印迹法检测HEL细胞中JAK2、p-JAK2、SOCS1、SHP1的蛋白表达水平。结果 （1）MPN组织中JAK2V617F/JAK2比值为（57.33±20.82）%，对照组为0%。MPN患者骨髓细胞质中p-JAK2、SOCS1、SHP1蛋白质表达量与对照组相比差异均有统计学意义（P均<0.01）。（2）MPN组织中SOCS1、SHP1蛋白表达量均与JAK2V617F突变量呈负相关（r=-0.648、-0.692，P均<0.05）。JAK2V617F/JAK2比值<50% MPN患者的SOCS1、SHP1蛋白表达水平高于JAK2V617F/JAK2比值≥ 50%的MPN患者（P均<0.01），p-JAK2的蛋白表达水平低于JAK2V617F/JAK2比值≥ 50%者（P<0.01）。（3）250 nmol/L鲁索替尼处理24、48、72 h后，HEL细胞活力分别为（60.06±3.87）%、（52.05±2.88）%、（36.43±2.01）%。随着鲁索替尼浓度的增加，HEL细胞中JAK2的mRNA和蛋白表达与p-JAK2的蛋白表达水平逐渐降低（P<0.01，P<0.05），SOCS1和SHP1的mRNA和蛋白表达逐渐增加（P均<0.01）。结论 鲁索替尼能够抑制HEL细胞中JAK2的mRNA和蛋白表达及其磷酸化水平，增加SOCS1、SHP1 mRNA和蛋白表达，降低HEL细胞的活力。

Expression of SOCS1 and SHP1 in JAK2V617F mutation positive myeloproliferative neoplasms and regulation effect of ruxolitinib