| 免疫外科法分离克隆BALB/c小鼠胚胎干细胞 |
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| 引用本文： | 徐小明 窦忠英 华进联 葛秀国. 免疫外科法分离克隆BALB/c小鼠胚胎干细胞[J]. 实验动物与比较医学, 2004, 0(3): 129-133 |
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| 作者姓名： | 徐小明 窦忠英 华进联 葛秀国 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术研究中心 杨凌712100(徐小明，窦忠英，华进联)，西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术研究中心 杨凌712100(葛秀国) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目 (3 0 0 70 3 74)，陕西省重点科技计划项目资助。 |
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| 摘 要： | 目的 使用免疫外科法分离克隆BALB c小鼠胚胎干细胞 (embryonicstemcells,ES细胞 ) ,为进一步建立BALB c小鼠ES细胞系打下基础。方法 用免疫外科法从 4 5枚BALB c小鼠囊胚中分离得到 2 0枚去除滋养层细胞的ICM ,接种在MEF饲养层上 ,使用DMEM(高糖 ) 15 ?S 0 1mmol Lβ 巯基乙醇 0 0 1mmol L非必需氨基酸 10 0 0IU mlLIF 10 0IU mL青霉素 10 0IU ml链霉素培养液 ,17枚形成典型的ICM集落 (85 0 % ) ,有一枚胚胎传至第 10代。用于全胚培养的BALB c小鼠胚胎共 10 2枚 ,使用与免疫外科相同的培养方法 ,6 6枚形成典型的ICM集落 (6 4 7% ) ,其中一枚胚胎传至第 8代。结果 免疫外科法较全胚培养法有利于小鼠ES细胞的分离与克隆 ;添加LIF(10 0 0IU ml)有利于小鼠ES细胞的分离与传代 (P <0 0 5 ) ;0 0 5 %胰酶 0 0 0 8?TA是较好的ES细胞消化液 ,对细胞综合损伤力小 ,且传代后ES细胞集落形成能力也较高 (P <0 0 5 )。结论 分离得到的ES细胞经形态学观察 ,AKP染色 ,体外分化实验 ,核型分析等证明其具有胚胎干细胞的诸多特性。
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| 关 键 词： | BALB/c小鼠 内细胞团 胚胎干细胞 免疫外科 |
| 修稿时间： | 2003-08-21 |
Isolation and Culture of Embryonic Stem Cells from BALB/c Strain Mouse by Immunosurgery |
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| XU Xiao-ming,DOU Zhong-ying,HUA Jin-lian,GE Xiu-guo. Isolation and Culture of Embryonic Stem Cells from BALB/c Strain Mouse by Immunosurgery[J]. Laboratory Animal and Comparative Medicine, 2004, 0(3): 129-133 |
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| Authors: | XU Xiao-ming DOU Zhong-ying HUA Jin-lian GE Xiu-guo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | BALB/c strain mouse ICM embryonic stem cells immunosurgery |
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