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应用AdEasy系统构建携带反义多药耐药相关蛋白的重组腺病毒的实验研究
引用本文:陈琳,苟兴华,严律南,韩蕾,李德华,赵永恒,胡海洋,CHEN Lin,GOU Xin-hu,YAN Lü-Nan,HAN Lei,LI De-hu,ZHAO Yong-heng,HU Hai-yang. 应用AdEasy系统构建携带反义多药耐药相关蛋白的重组腺病毒的实验研究[J]. 南京医科大学学报(自然科学版), 2005, 25(11): 757-761,765,F0002
作者姓名:陈琳  苟兴华  严律南  韩蕾  李德华  赵永恒  胡海洋  CHEN Lin  GOU Xin-hu  YAN Lü-Nan  HAN Lei  LI De-hu  ZHAO Yong-heng  HU Hai-yang
作者单位:南京医科大学第一附属医院普外科 江苏南京210029(陈琳),成都地奥制药集团有限公司基因工程药物研究室 四川成都610041(苟兴华,韩蕾,李德华),四川大学华西医院普外科 四川成都610041(严律南,赵永恒),成都地奥制药集团有限公司基因工程药物研究室 四川成都610041(胡海洋)
基金项目:[基金项目]国家自然科学基金资助项目(30170925)
摘    要:
目的:应用腺病毒载体AdEasy系统构建携带反义多药耐药相关蛋白(multidrugresistance-associatedprotein,MRP)的重组腺病毒载体。方法:将MRP基因片段反向克隆到腺病毒载体质粒pAdTrack-CMV上,与骨架质粒在大肠杆菌BJ5183体内进行同源重组,经293细胞包装、扩增后得到携带反义MRP的重组腺病毒AdEasy-GFP-ASmrp。结果:成功地构建了携带反义MRP的重组腺病毒载体系统,经测定病毒滴度可达2.5×109efu/ml,感染复数(multiplicityofinfection,MOI)为100时对SMMC-7721/ADM细胞株转导效率可达90%以上。结论:腺病毒载体AdEasy系统能简便、有效地产生重组腺病毒,且生成的病毒滴度高、转导效率好,为进一步研究肝癌耐药机制及其逆转方式提供实验基础。

关 键 词:反义RNA技术 多药耐药 多药耐药相关蛋白 重组腺病毒
文章编号:1007-4368(2005)011-0757-06
收稿时间:2005-04-28
修稿时间:2005-04-28

Construction of the recombinant adenovirus vector carrying antisense multidrug resistance-associated protein with AdEasy system
CHEN Lin,GOU Xin-hua,YAN L -Nan,HAN Lei,LI De-hua,ZHAO Yong-heng,HU Hai-yang. Construction of the recombinant adenovirus vector carrying antisense multidrug resistance-associated protein with AdEasy system[J]. Acta Universitatis Medicinalis Nanjing, 2005, 25(11): 757-761,765,F0002
Authors:CHEN Lin  GOU Xin-hua  YAN L -Nan  HAN Lei  LI De-hua  ZHAO Yong-heng  HU Hai-yang
Affiliation:CHEN Lin,GOU Xin-hua1,YAN L -Nan2*,HAN Lei1,LI De-hua1,ZHAO Yong-heng2,HU Hai-yang1
Abstract:
Keywords:antisense RNA technique   muhidrug resistance   multidrug resistance-associated protein   recombinant adenovirus
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