Yes相关蛋白通过Wnt/β-catenin信号通路调控软骨细胞Sox9表达的研究 |
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引用本文: | 鲍远,黄俊明,吴颖星,陈琨,程鹏,郭风劲,陈安民.Yes相关蛋白通过Wnt/β-catenin信号通路调控软骨细胞Sox9表达的研究[J].骨科,2016,7(3):195-200. |
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作者姓名: | 鲍远 黄俊明 吴颖星 陈琨 程鹏 郭风劲 陈安民 |
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作者单位: | 华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科, 武汉,430030 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(81171696,81472082) |
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摘 要: | 目的研究Yes相关蛋白(Yes?associated protein, YAP)通过Wnt/β?catenin信号通路调控软骨细胞Sox9表达的机制。方法用siRNA分别沉默YAP基因和Lats1基因来调控YAP的活性,通过Real?time PCR检测软骨特异性基因和Wnt/β?catenin信号通路下游基因的表达;通过Western Blot检测GSK3β的磷酸化水平、活化β?catenin的蛋白水平以及Sox9的蛋白水平;并通过阿利新蓝染色检测软骨细胞外基质的分泌情况。用siRNA沉默YAP基因后,再用氯化锂干预细胞,通过Western Blot检测Sox9的表达和GSK3β的磷酸化水平。结果沉默YAP基因后,磷酸化GSK3β和活化β?catenin的蛋白水平减少,c?Myc和Nanog基因表达减少,Sox9、Col2和Aggrecan基因表达升高,并且软骨细胞分泌基质增多;沉默Lats1基因后,磷酸化GSK3β和活化β?catenin的蛋白水平增加,c?Myc和Nanog基因表达上调,Sox9、Col2和Aggre?can基因表达减少,并且软骨细胞分泌基质减少。此外,氯化锂可以阻断沉默YAP引起的Sox9表达上调。结论 YAP通过Wnt/β?catenin信号通路调控软骨细胞Sox9的表达。
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关 键 词: | 软骨细胞 细胞分化 Yes相关蛋白 信号传导 基因表达调控 |
收稿时间: | 2015/12/11 0:00:00 |
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