膀胱癌T24细胞中RUNX3基因对Smad4表达的影响

目的 观察RUNX3基因重组质粒转染人膀胱癌T24细胞后细胞增殖及凋亡的变化以及Smad4 mRNA表达的变化，探讨RUNX3基因与转化生长因子-β（TGF-β）/Smad信号通路在膀胱癌发生机制中的作用。方法 构建pIRES-EGFP-RUNX3质粒，将T24细胞分空白对照组（不转染）和空载体质粒组以及重组质粒组。空载体质粒组和重组质粒组细胞分别转染pIRES-EGFP和pIRES-EGFP-RUNX3，转染24 h后采用荧光显微镜观察细胞形态的变化；流式细胞仪检测细胞凋亡情况；RT-PCR检测各组细胞RUNX3、Smad4基因mRNA表达水平。结果 成功构建pIRES-EGFP-RUNX3重组质粒，显微镜观察发现转染组均出现细胞死亡，重组质粒组出现凋亡细胞；转染24 h后空白对照组凋亡率为（3.23±0.45）%，空载体质粒组为（8.98±1.62）%，重组质粒组为（43.61±2.69）%；RUNX3 mRNA仅重组质粒组有表达（2.79±0.36），重组质粒组Smad4 mRNA较另两组表达上调(P <0.05)。结论 转染RUNX3基因可上调膀胱癌T24细胞中Smad4 mRNA的表达，且能抑制细胞增殖并促进其凋亡，抑癌基因RUNX3可能通过TGF-β/Smad信号通路参与对膀胱肿瘤细胞增殖与凋亡的调控。

Effect of RUNX3 on the Expression of Smad4 in T24 Bladder Cancer Cell Line