| 丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3反式激活基因2的克隆化研究 |
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| 引用本文： | 党晓燕,成军,刘妍,邓红,杨倩,王建军,纪冬,王春花. 丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3反式激活基因2的克隆化研究[J]. 胃肠病学和肝病学杂志, 2003, 12(3): 241-244 |
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| 作者姓名： | 党晓燕 成军 刘妍 邓红 杨倩 王建军 纪冬 王春花 |
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| 作者单位： | 100039,北京,解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心 |
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| 基金项目： | 军队回国留学人员启动基金资助课题(98H038)，国家自然科学基金攻关项目(C0 30 114020,C30 0 70 689)，军队“九、五”科技攻关项目(98D0 63)，军队“十、五”科技攻关青年基金项目(01Q138)，军队“十五”科技攻关项目(01B135) |
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| 摘 要： | ![]()
目的 应用抑制性消减杂交技术(SSH)及生物信息学技术(bioinformcs)筛选并克隆丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白3(NS3)反式激活新型靶基因，进一步阐明HCV感染相关疾病的发病机制。方法 以HCVNS3蛋白表达质粒pcDNA3．1(-)-NS3转染HepG2细胞，以空载体pcDNA3．1(-)为平行对照，提取mRNA并进行抑制性消减杂交分析。并应用分子生物学技术，结合生物信息学技术，克隆HCvNS3反式激活作用的新的靶基因。结果 对于所获基因片段序列分析表明，其中之一为新型基因片段，从HepG2细胞提取总RNA，以逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术扩增获得该新基因的全长序列，并测序证实，因其可以被NS3蛋白反式激活，故命名为NS3TP2，在GenBank中注册，注册号为AYll6970。NS3TP2基因的编码序列全长为1299个核苷酸(nt)，编码产物由432个氨基酸残基(aa)组成。结论 HCVNS3是一种典型的病毒基因组编码的具有反式激活作用的蛋白，而抑制性消减杂交(SSH)是一种鉴定、分离组织细胞中选择性表达基因的技术。通过这种技术，发现了HCVNS3反式激活作用的新的靶基因，这一发现，为进一步研究HCVNS3蛋白反式激活作用的分子生物学机制和探索新型治疗技术奠定基础。
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒 非结构蛋白NS3 反式激活 基因克隆化 抑制性消减杂交技术 发病机制 生物信息学技术 |
| 修稿时间： | 2003-05-14 |
Cloning and identification of human gene 2 transactivated by nonstructural protein 3 of hepatitis C virus |
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| DANG Xiaoyan,CHENG Jun,LIU Yan,et al Gene Therapy Research Center. Cloning and identification of human gene 2 transactivated by nonstructural protein 3 of hepatitis C virus[J]. Chinese Journal of Gastroenterology and Hepatology, 2003, 12(3): 241-244 |
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| Authors: | DANG Xiaoyan CHENG Jun LIU Yan et al Gene Therapy Research Center |
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| Affiliation: | DANG Xiaoyan,CHENG Jun,LIU Yan,et al Gene Therapy Research Center,Institute of Infectious Diseases,The 302 Hospital of PLA,Beijing 100039,China |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | Hepatitis C virus NS3 protein Transactivation Gene cloning |
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