蛋白激酶CK2β SiRNA对肺腺癌细胞A549增殖的抑制作用

目的:探讨蛋白激酶CK2β特异性小干RNA对肺腺癌细胞系A549生长增殖的影响.方法:构建CK2βsiRNA表达质粒稳定转染A549细胞,RT-PCR、免疫印迹、免疫细胞化学技术检测转染前后CK2β的mRNA和蛋白表达水平,同位素掺入法测定细胞内CK2活性,细胞计数法绘制细胞生长曲线,计算细胞倍增时间,流式细胞术分析细胞周期.结果:与空白组和阴性对照组相比,稳定转染pGPU6-CSNK2B质粒后.A549细胞中Cl(2B的mRNA水平、胞浆蛋白表达水平以及CK2活性均明显下降(P＜0.05),但各组间细胞核中CK2β的蛋白表达水平无明显差异(P＞0.05);A549细胞生长明显受到抑制,倍增时间增加;A549细胞阻滞于G0/G1期.结论:CK2B siRNA可以下调A549细胞中CK2β表达及其激酶活性,并抑制细胞增殖;本研究为CK2特异性siRNA作为抗肿瘤药物的开发和CK2药靶的研究奠定了基础.