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Lewis大鼠骨髓间充质干细胞分离培养和鉴定
引用本文:郑辉哲,林群,雷立华,杨进,韩涛.Lewis大鼠骨髓间充质干细胞分离培养和鉴定[J].福建医科大学学报,2005,39(4):360-363.
作者姓名:郑辉哲  林群  雷立华  杨进  韩涛
作者单位:1. 福建省肿瘤医院麻醉科,福州,350014
2. 福建医科大学附属第一医院麻醉科,福州,350005
3. 福建省立医院心血管研究所心外科,福州,350001
4. 福建医科大学附属口腔医院种植中心,福州,350002
摘    要:目的建立从Lewis大鼠骨髓中分离、培养间充质干细胞的方法,并对分离、培养的间充质干细胞进行鉴定.方法采用Percoll(1.073g/L)密度梯度分离和贴壁培养相结合的方法分离培养Lewis大鼠的骨髓间充质干细胞(MSC).MSC细胞鉴定:采用相差显微镜观察MSC的形态学特征;流式细胞仪检测细胞表面标志抗原CD29,CD90,CD34和CD45的表达率;苏丹Ⅳ染色检测MSC成脂细胞分化;碱性磷酸酶染色和茜素红染色检测MSC成骨分化.结果原代培养的MSC于24 h后贴壁,48~72 h形成集落,12~15 d可达到80%~90%融合.第1代细胞表面标记物CD29,CD90,CD34和CD45的阳性率分别为80.41%,66.27%,2.73%,0.74%.第3代细胞表面标记物CD29,CD90,CD34和CD45的阳性率分别为89.91%,88.17%,0.81%,0.17%.细胞周期分析显示,第5代细胞G0/G1期细胞占68.9%,S+G2+M期为31.1%.用α-MEM培养液培养的第6代细胞部分分化为成骨和成脂细胞.结论采用Percoll(1.073g/L)密度梯度分离和贴壁培养相结合的方法能够成功分离和培养大鼠的MSC.第5代MSC细胞保持分化潜能.

关 键 词:大鼠  近交Lew  细胞分离  细胞培养  干细胞  骨髓细胞  细胞周期  细胞分化
文章编号:1672-4194(2005)04-0360-04
收稿时间:2005-04-05
修稿时间:2005-07-14

Isolation, Cultivation and Identification of Mesenchymal Stem Cells from Lewis Rat Bone Marrow
ZHENG Hui-zhe,LIN Qun,LEI Li-hua,YANG Jin,HAN Tao.Isolation, Cultivation and Identification of Mesenchymal Stem Cells from Lewis Rat Bone Marrow[J].Journal of Fujian Medical University,2005,39(4):360-363.
Authors:ZHENG Hui-zhe  LIN Qun  LEI Li-hua  YANG Jin  HAN Tao
Institution:1.Department of Anesthesiology, Fujian Provincial Tumor Hospital, Fuzhou 350014, China; 2. Department of Anesthesiology, The Affiliated First Hospital, Fujian Medical University, Fuzhou 350005, China;3. Department of Surgery, Fujian Provincial Research Lnstitate for Cardiovascular Diseases, Fuzhou 350001, China ;4. Center of Implantion, The Affiliated Stomatological Hospital, Fujian Medical University, Fuzhou 350002, China
Abstract:
Keywords:rats  Inbred lew  cell separation  cell  culture  stem cells  bone marrow cells  cell cycle  cell differentiation
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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