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霍山石斛微卫星标记的筛选及遗传多样性分析
引用本文:郑基阳,陈乃富,王晖,高鹏,邵剑文,朱国萍. 霍山石斛微卫星标记的筛选及遗传多样性分析[J]. 中国中药杂志, 2011, 36(21): 2926-2931
作者姓名:郑基阳  陈乃富  王晖  高鹏  邵剑文  朱国萍
作者单位:1. 安徽师范大学分子生物学及生物技术研究所,安徽芜湖,241000
2. 植物细胞工程安徽省工程技术研究中心,安徽六安,237012
3. 安徽师范大学分子生物学及生物技术研究所,安徽芜湖241000;生物环境与生态安全安徽省高校重点实验室,安徽芜湖241000
基金项目:国家自然科学基金项目(30870062,31040003);教育部新世纪优秀人才计划项目(NCET-06-0558)
摘    要:
目的:利用磁珠富集法构建霍山石斛的微卫星文库,用筛选出的微卫星引物对安徽霍山居群的24株野生霍山石斛进行遗传多样性分析.方法:根据链亲和素磁珠和生物素特异结合的特性,用3'端生物素标记的探针与两端连接已知序列人工接头的霍山石斛基因组DNA酶切片段杂交,杂交复合物结合到包被有链亲和素的磁珠上,洗脱并收集吸附在磁珠上的含有微卫星的片段.经过克隆和测序,再根据微卫星两侧的保守序列设计引物,最后利用从中筛选出的微卫星引物对霍山石斛居群进行遗传学分析.结果:本实验共筛选得到12对多态性位点丰富、带型清晰、重复性好的引物,并检测到65个等位基因,每个位点的等位基因数从2到8个不等,平均预期杂合度(HE)和平均观察杂合度(HO)分别为0.638,0.500.12个多态性位点的哈温平衡检测结果显示有2个位点显著偏离哈温平衡(P<0.05),可能是由于存在无效等位基因.连锁不平衡检测结果表明有3对位点显著连锁不平衡(P<0.05);结论:这些微卫星标记可以用于霍山石斛的居群遗传学分析.

关 键 词:霍山石斛  微卫星标记  居群遗传学
收稿时间:2011-05-28

Isolation and analysis of polymorphic microsatellite loci in Dendrobium huoshanense
ZHENG Jiyang,CHEN Naifu,WANG Hui,GAO Peng,SHAO Jianwen and ZHU Guoping. Isolation and analysis of polymorphic microsatellite loci in Dendrobium huoshanense[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2011, 36(21): 2926-2931
Authors:ZHENG Jiyang  CHEN Naifu  WANG Hui  GAO Peng  SHAO Jianwen  ZHU Guoping
Affiliation:Institute of Molecular Biology and Biotechnology, Anhui Normal University, Wuhu 241000, China;Engineering and Technology Research Center of Plant Cell Engineering in Anhui Province, Liuan 237012, China;Institute of Molecular Biology and Biotechnology, Anhui Normal University, Wuhu 241000, China;Key Laboratory of Biotic Environment and Ecological Safety in Anhui Province, Anhui Normal University, Wuhu 241000, China;Institute of Molecular Biology and Biotechnology, Anhui Normal University, Wuhu 241000, China;Institute of Molecular Biology and Biotechnology, Anhui Normal University, Wuhu 241000, China;Key Laboratory of Biotic Environment and Ecological Safety in Anhui Province, Anhui Normal University, Wuhu 241000, China;Institute of Molecular Biology and Biotechnology, Anhui Normal University, Wuhu 241000, China;Key Laboratory of Biotic Environment and Ecological Safety in Anhui Province, Anhui Normal University, Wuhu 241000, China
Abstract:
Keywords:Dendrobium huoshanense  microsatellite markers  population genetics
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