| 表达结核特异性 Vγ9 Vδ2 TCR 双链单体的果蝇 S2恒定细胞系的构建和鉴定 |
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| 作者姓名： | 涂晓欣 张洁 孟繁荣 方毅敏 杨芳芳 赖小敏 |
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| 作者单位： | 1. 510080 广州，中山大学中山医学院微生物学教研室，热带病防治研究教育部重点实验室，海洋微生物功能分子广东省高校重点实验室，广东省重大传染病预防和控制技术中心
2. 广州市胸科医院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目(81271779)；十二·五传染病重大专项分任务 |
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| 摘 要： | 目的：转染及筛选鉴定能够稳定表达和分泌V γ9Vδ2 T细胞受体（ TCR）双链单体的果蝇S2恒定细胞系。方法利用氯化钙转染法将TCR γ9-FB-pMT／V5-His B质粒、TCR δ2-JB-pMT／V5-His A质粒、pMT／Bip-BirA质粒和pCoHygro潮霉素质粒转染进S2细胞中，用潮霉素B筛选恒定细胞系后表达生物素化的结核特异性Vγ9Vδ2 TCR双链单体，并加以鉴定。结果斑点印迹试验、SDS-PAGE和Western blot表明细胞培养上清中有V γ9Vδ2 TCR单体，且已被成功生物素化。结论成功筛选出能稳定分泌表达Vγ9 V δ2 TCR的果蝇S2恒定细胞系，为研究γδ T细胞的免疫识别提供实验资料。
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| 关 键 词： | γδT细胞受体 双链单体 S2细胞 |
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