miR⁃199a⁃5p在肝脏组织中的表达及其作用的初步研究

目的：探究不同营养状态下miR-199a-5p在肝脏中的表达水平,以及其对肝细胞甘油三酯（triglyceride,TAG）含量的影响及其潜在机制。方法：RT-qPCR检测高脂饮食小鼠肝脏组织中miR-199a-5p的表达;分别使用miR-199a-5p模拟物、抑制剂、阴性对照和pcDH-CD36-flag质粒转染Hepa1-6和AML12细胞,通过RT-qPCR和Western blot检测脂代谢相关标志物表达变化,采用试剂盒检测TAG含量;通过miRDB（microRNA Target Prediction Database）预测miR-199a-5p的靶基因并通过双荧光素酶报告实验进行验证。结果：高脂饮食和饥饿状态下C57BL/6J小鼠肝脏中miR-199a-5p的表达水平升高;过表达miR-199a-5p 能够降低肝细胞内TAG,而miR-199a-5p抑制剂会增加细胞内TAG含量;miR-199a-5p通过作用于脂肪酸转位酶CD36基因的 3′非翻译区（3′ untranslated region,3′ UTR）降低其蛋白表达。结论：在肝脏脂质积累过程中,miR-199a-5p的表达水平增加,并且miR-199a-5p可能通过靶向CD36降低肝细胞内TAG含量。