| 摘 要： | 目的:验证针对实验室前期筛选到的新有丝分裂期调控分子候选蛋白mRNA前体剪切因子19(pre-mRNA processing factor 19,Prp19)功能和查明作用机制。方法:采用多个靶向不同序列的siRNA在He La细胞中敲低Prp19,应用流式细胞术检测Prp19敲减对细胞周期进程的影响。采用Time-lapse成像技术进一步明确Prp19干涉对细胞分裂的影响。采用冷处理实验观测Prp19干涉对微管与着丝粒连接的影响。应用AnnexinⅤ-FITC细胞凋亡检测和Caspase 3、PARP免疫印迹实验检测Prp19干涉对细胞凋亡的影响。结果:流式细胞术检测结果表明,Prp19干涉导致有丝分裂期阻滞。Time-lapse成像动态观测发现Prp19干涉导致细胞前中期阻滞和染色体错误排列。冷处理实验结果表明干涉Prp19损害了微管与着丝粒的连接。AnnexinⅤ-FITC细胞凋亡检测以及Caspase 3、PARP免疫印迹检测结果显示Prp19干涉导致肿瘤细胞凋亡。结论:Prp19是细胞有丝分裂正常进程中不可或缺少的蛋白质,抑制Prp19可能对抗有丝分裂的抗肿瘤药物研发提供新的策略。
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