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人穿孔素N端肽段的放射诱导表达研究
引用本文:张蕾,李芳秋,韩艳玲,朱锡旭. 人穿孔素N端肽段的放射诱导表达研究[J]. 中国免疫学杂志, 2008, 24(5): 403-406
作者姓名:张蕾  李芳秋  韩艳玲  朱锡旭
作者单位:1. 南京师范大学生命科学学院,南京,210002
2. 南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所,南京,210002
3. 南京军区南京总医院放射治疗科,南京,210002
摘    要:
目的:构建人穿孔素N端(hPFN—N)的真核放射诱导表达载体,并在放射诱导条件的刺激下研究hPFN-N的表达产物(rhPFN-N)在肺癌细胞SPC—A1中的分布及其对该细胞的细胞毒性作用。方法:以克隆有hPFN全长cDNA序列的载体pcDNA3.1(+)/hPFN为模板,用PCR扩增hPFN-N,将该基因片段克隆到含放射诱导启动子的真核表达载体pcDNA3.1(+)/Egr-1中,以重组体稳定转染SIC—A1细胞,经过X射线的放射诱导后,应用RT-PCR、细胞免疫化学法检测hPFN-N蛋白的表达,用MTT法测定该蛋白对靶细胞的杀伤活性。结果:成功构建了真核放射诱导表达载体pcDNA3.1(+)/Egr-hPFN-N。以重组体转染SPC—A1细胞后,用RT-PCR检测到hPFN-N mRNA的表达。细胞免疫化学法检测结果呈阳性反应,MTT法检测结果为rhPFN-N对靶细胞的杀伤活力为29.2%。结论:构建了pcDNA3.1(+)/Egr-hPFN-N真核放射诱导表达载体,在经过X射线的放射诱导后,hPFN-N能够在SPC—A1细胞的细胞膜上大量表达,表达产物rhPFN-N对靶细胞有明显杀伤活力。

关 键 词:穿孔素  Egr-1启动子  放射诱导  杀伤活性  SIC—A1细胞
文章编号:1000-484X(2008)05-0403-05
修稿时间:2007-10-29

Radiation-inducible expression of human perforin N-terminal in lung cancer cells
ZHANG Lei,LI Fang-Qiu,HAN Yan-Ling,ZHU Xi-Xu. Radiation-inducible expression of human perforin N-terminal in lung cancer cells[J]. Chinese Journal of Immunology, 2008, 24(5): 403-406
Authors:ZHANG Lei  LI Fang-Qiu  HAN Yan-Ling  ZHU Xi-Xu
Abstract:
Keywords:
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