芪玉三龙方抑制A549肺癌细胞对miRNA21“成瘾”的机制

目的 探讨芪玉三龙方（QYSL）抑制A549肺癌细胞对微小RNA21（miRNA21）“成瘾”的分子机制。方法 选择人A549肺癌细胞,常规传代培养,分别设置为空白组,空白血清组,含药血清组,干扰小RNA（siRNA）组。制备QYSL含药血清,以前期研究筛选的最佳药物浓度和作用时间进行干预。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测及实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR） miRNA21及其靶向信号通路第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物（PTEN）/磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）相关分子的蛋白及mRNA的表达。结果 与空白血清组比较,含药血清组和siRNA组的miRNA21 mRNA表达显著降低,PTEN mRNA的表达显著升高,差异具有统计学意义（P<0.01）。与空白血清组比较,含药血清组和siRNA组的PI3K,雷帕霉素靶蛋白（mTOR） mRNA表达显著降低,差异具有统计学意义（P<0.01）,但含药血清组蛋白激酶B（Akt） mRNA的表达无明显差异。与空白血清组比较,含药血清组和siRNA组的PTEN蛋白表达明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）;含药血清组磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）,磷酸化雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）蛋白表达明显降低（P<0.05）,总蛋白Akt,mTOR表达无明显降低,PI3K蛋白的表达降低,但差异无统计学意义。结论 QYSL可抑制miRNA21的转录,使PTEN表达有所上升,下调PI3K/Akt/mTOR信号通路关键分子表达,从而温和抑制肺癌细胞对致癌基因的“成瘾”现象,阻断肺癌细胞增殖。

Mechanism of Qiyu Sanlong Prescription in Inhibiting Addiction of Lung Cancer A549 Cells to miRNA21