三焦祛湿方对C-BSA诱导膜性肾病小鼠肾脏保护作用及其对Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的 探索三焦祛湿方对阳离子化牛血清白蛋白（C-BSA）诱导膜性肾病（MN）小鼠肾脏保护作用及其对核因子E₂相关因子2（Nrf2）/血红素氧合酶-1（HO-1）信号通路影响。方法 雌性BALB/c小鼠60只，随机分为正常组10只，模型组50只。模型组小鼠尾静脉注射C-BSA（6.5 mg·kg^-1），造模成功小鼠按体质量随机分为模型组、三焦祛湿方低剂量（3.71 g·kg^-1）组，三焦祛湿方高剂量（7.42 g·kg^-1）组及盐酸贝那普利（1.3 mg·kg^-1）组，分别给予各组相应剂量的药物灌胃，1次/d，连续4周。分别于造模前、造模后及治疗后检测24 h尿蛋白定量。给药后，腹主动脉取血检测血尿素氮（BUN），血清肌酐（SCr），甘油三酯（TG），总胆固醇（TC），总蛋白（TP），白蛋白（Alb）水平，肾组织行苏木素-伊红（HE），马松（Masson），过碘酸-六胺银（PASM）染色，光镜下观察小鼠肾组织病理形态变化，免疫荧光检测肾组织免疫球蛋白G（IgG）沉积情况，采用免疫荧光法检测肾组织中活性氧（ROS）表达情况。蛋白免疫印迹法（Western blot）观察肾组织Nrf2蛋白在细胞质和细胞核的表达情况，以及其下游因子血红素氧合酶-1（HO-1），醌还原型辅酶Ⅰ（NADH）脱氢酶1（NQO1）蛋白表达水平。结果 模型组小鼠24 h尿蛋白水平显著升高（P<0.01），血清TG，TC水平显著升高（P<0.01），TP，Alb水平显著降低（P<0.01）；光镜下观察肾脏病理改变，可见肾小球体积增大，基底膜增厚，嗜复红蛋白沉积，“钉突”形成；荧光显微镜下可见IgG沿毛细血管襻弥漫性沉积；肾组织ROS表达水平显著升高（P<0.01）；肾组织细胞核内Nrf2蛋白表达显著升高（P<0.01），细胞质Nrf2蛋白表达显著降低（P<0.01），HO-1和NQO1蛋白表达显著升高（P<0.01）；给药后，各治疗组小鼠24 h尿蛋白水平显著降低（P<0.01），血清TG，TC水平显著降低（P<0.01），TP，Alb水平明显升高（P<0.05，P<0.01）；各治疗组肾组织病理损害明显改善；肾组织ROS表达水平显著降低（P<0.01）；肾组织细胞核内Nrf2蛋白表达显著降低（P<0.01），细胞质Nrf2蛋白表达不同程度升高（P<0.05，P<0.01），HO-1和NQO1蛋白表达显著升高（P<0.01）。结论 三焦祛湿方可能通过调控膜性肾病肾组织Nrf2/HO-1信号表达，缓解肾组织氧化应激，进而降低24 h尿蛋白定量，降低血脂水平，提高血清蛋白含量，减轻肾脏病理损害，起到明显的肾脏保护及延缓病程进展的作用。

Renoprotective Effect of Sanjiao Qushi Prescription Against Cationic Bovine Serum Albumin Induced Membranous Nephropathy Mice Model and Its Influence on Nrf2/HO-1 Signaling Pathway