调肝方药对慢性束缚应激大鼠神经内分泌免疫功能的影响

七情致病理论及其防治是中医病因病机学中的一个重要内容，但目前相关研究较少，现代医学中的心理应激理论与中医七情学说在认识上存在着许多共同点，从应激角度出发，结合中医"怒伤肝"的理论，以束缚制动作为应激原，复制慢性激怒应激反应大鼠模型，并探讨调肝方药(TGFY)对应激大鼠神经内分泌免疫功能的影响。1 材料与方法1.1 主要试剂 细胞培养液RPMI-1640(Gibco产品)，刀豆素A(ConA，Sigma产品)，3H-TdR(中国科学院原子能研究所产品)，莨菪葶(9．61μg，Sigma产品)，辣根过氧化物酶(HRP，10μg，Sigma产品)，十四酰佛波乙酸酯(PMA，100ng，Sigma产品)。125I-CRH、125I-ACTH、125I-CORT放免检测药盒(美国DPC产品)。1.2 大鼠应激模型制作及分组处理 雄性Wistar大鼠，体重250～300 g，分为正常对照组10只(正常饮食，不给任何刺激)；慢性束缚应激组1O只(给予束缚刺激，正常饮食，不给中药治疗)；调肝方药组10只(给予束缚刺激的同时灌胃调肝方药)。慢性束缚应激反应大鼠模型的制作取雄性Wistar大鼠20只，体重250～300 g，每2只一笼，每日给予黑暗和光照各12 h，20～22℃，同时给予每日1次成对双后肢的立式束缚，以引起明显的激怒应激反应(粗叫、站立对峙、扭打嘶咬)，首次30min，以后隔日增加10min，共2 w。普通饲料，自由饮水。于实验第13天和第14天在动物清醒、安静状态下断头处死取材。1.3 药物组成剂量及给药方法 所用中药均由本校第一附属医院药房提供的纯正药材。调肝方药组成及剂量：柴胡15g、白芍15 g，香附10 g，山萸肉15 g，郁金10 g，枳壳10g。将上述药物制成100％水煎剂，每毫升含生药1 g，给予大鼠1 ml／100 g体重灌胃，每日2次，共2 w。对照组及应激组灌服等量生理盐水。