| 细菌内同源重组法构建LEDGFp52基因腺病毒载体及其体外表达 |
| |
| 引用本文： | 赵海生,王一. 细菌内同源重组法构建LEDGFp52基因腺病毒载体及其体外表达[J]. 眼科新进展, 2006, 26(12): 900-903 |
| |
| 作者姓名： | 赵海生 王一 |
| |
| 作者单位： | 400038,重庆市,第三军医大学附属西南医院眼科 |
| |
| 摘 要： | ![]()
目的构建表达人类晶状体来源的上皮生长因子p52(lens epithelium derivedgrowthfactor p52,LEDGFp52)重组腺病毒载体,检测LEDGFp52重组腺病毒能否在真核细胞中有效表达目的基因。方法将LEDGFp52基因片段亚克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV上构建腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV-LEDGFp52,将腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV-LEDGFp52与5型腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转染BJ5183细菌,经细菌内同源重组产生携带LEDGFp52基因的重组腺病毒载体pAd-LEDGFp52,将pAd-LEDGFp52经脂质体法转化293细胞包装产生重组腺病毒Ad-LEDGFp52,将Ad-LEDGFp52体外转染293细胞,CPE法及Westernblot观察目的基因的表达。结果构建了表达LEDGFp52基因的重组腺病毒质粒,E.coli内成功同源重组腺病毒,在293细胞内包装产生重组腺病毒Ad-LEDGFp52,滴度可达5×1012PFU·L-1。在真核细胞中有效表达目的基因LEDGFp52,出现显著的CPE效应。结论成功构建表达LEDGFp52的重组腺病毒载体,为进一步进行LEDGF p52基因功能的研究提供了实验基础。
|
| 关 键 词： | LEDGFp52基因 腺病毒载体 体外表达 |
| 文章编号： | 1003-5141(2006)12-0900-04 |
| 收稿时间： | 2006-07-26 |
| 修稿时间： | 2006-09-04 |
Construction of recombinant adenoviral vector carrying LEDGFp52 gene by homologous recombination in bacteria and its expression in vitro |
| |
| ZHAO Hai-Sheng,WANG Yi. Construction of recombinant adenoviral vector carrying LEDGFp52 gene by homologous recombination in bacteria and its expression in vitro[J]. Recent Advances in Ophthalmology, 2006, 26(12): 900-903 |
| |
| Authors: | ZHAO Hai-Sheng WANG Yi |
| |
| Abstract: | ![]()
|
| |
| Keywords: | LEDGFp52 gene adenovirus vector expression in vitro |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
