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绿原酸人工抗原的合成及多克隆抗体的制备
引用本文:薛 瑾,屈会化,孙 晔,张 越,王雪茜,续洁琨,赵 琰,王庆国. 绿原酸人工抗原的合成及多克隆抗体的制备[J]. 中草药, 2014, 45(4): 480-484
作者姓名:薛 瑾  屈会化  孙 晔  张 越  王雪茜  续洁琨  赵 琰  王庆国
作者单位:1.北京中医药大学 科研实验中心,北京 100029 2.北京中医药大学基础医学院,北京 100029 3.北京中医药大学“经典方剂的应用基础研究”创新团队,北京 100029
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81274043,81373542);“重大新药创制”国家专项课题(2010ZX09502-002)
摘    要:目的 合成绿原酸(chlorogenic acid,CHA)人工抗原,制备CHA多克隆抗体,为制备过敏成分分析的免疫芯片奠定基础。方法 采用碳二亚胺法分别合成CHA免疫抗原(CHA-牛血清白蛋白)和包被抗原(CHA-卵清蛋白);UV法和TLC法鉴定人工抗原偶联是否成功;间接ELISA方法检测免疫小鼠血清中抗体效价;间接竞争ELISA方法检测抗体特异性。结果 经UV法和TLC法检测,CHA与BSA偶联成功。血清抗体效价为1∶128 000,CHA-PAbs的质量浓度与抑制率的线性方程为Y=?0.10 lnX+1.158,线性检测范围为15.6~250 ng/mL,R2=0.995,并且和甘草酸、黄芩苷等与其常配伍应用的中药化合物均无交叉反应。结论 成功制备了灵敏度高、特应性好的CHA多克隆抗体,为CHA的微量检测和过敏性研究提供了实验依据。

关 键 词:绿原酸;人工抗原;多克隆抗体;碳二亚胺法;免疫分析

Synthesis of artificial chlorogenic acid antigen and preparation of polyclonal antibodies
XUE Jin,QU Hui-hu,SUN Ye,ZHANG Yue,WANG Xue-qian,XU Jie-kun,ZHAO Yan,WANG Qing-guo. Synthesis of artificial chlorogenic acid antigen and preparation of polyclonal antibodies[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2014, 45(4): 480-484
Authors:XUE Jin  QU Hui-hu  SUN Ye  ZHANG Yue  WANG Xue-qian  XU Jie-kun  ZHAO Yan  WANG Qing-guo
Abstract:
Keywords:chlorogenic acid   artificial antigen   polyclonal antibody   carbodiimide method   immune analysis
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