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人源性大肠癌cDNA噬菌体库的构建及PCR鉴定
引用本文:刘宇虎,张振书,武金宝,钟东,崔海宏,王亚东.人源性大肠癌cDNA噬菌体库的构建及PCR鉴定[J].解放军医学杂志,2003,28(7):608-610.
作者姓名:刘宇虎  张振书  武金宝  钟东  崔海宏  王亚东
作者单位:510515,广州,第一军医大学南方医院
基金项目:国家自然科学基金资助课题 (编号 30 1 71 0 53)
摘    要:为构建人源性大肠癌cDNA噬菌体表达文库 ,从人大肠癌组织中提取总RNA ,纯化mRNA ,用RT PCR反转录合成cDNA第一链 ,用LD PCR合成cDNA第二链 ,除去小于 5 0 0bp的小片段 ,与λTriplEx2噬菌体连接 ,体外包装。转化E .coliXL1 blue大肠杆菌 ,滴定文库的滴度 ,用IPTG和X gal测定重组率。用PCR鉴定插入cDNA片段大小。构建成含 2 .0 7× 10 6 pfu/ml重组子的人大肠癌cDNA噬菌体表达文库 ,重组率为 94.5 % ,插入外源cDNA片段大小从 60 0bp~ 4kb ,平均约 1.4kb。文库合符要求 ,适合于大批量筛选cDNA克隆的大肠癌相关抗原基因

关 键 词:结肠直肠肿瘤  噬菌体  cDNA文库
修稿时间:2003年1月14日

CONSTRUCTION OF HUMAN COLORECTAL CARCINOMA cDNA PHAGE EXPRESSION LIBRARY AND ITS IDENTIFICATION BY PCR
Liu Yuhu,Zhang Zhenshu,Wu Jinbao et al.CONSTRUCTION OF HUMAN COLORECTAL CARCINOMA cDNA PHAGE EXPRESSION LIBRARY AND ITS IDENTIFICATION BY PCR[J].Medical Journal of Chinese People's Liberation Army,2003,28(7):608-610.
Authors:Liu Yuhu  Zhang Zhenshu  Wu Jinbao
Institution:Liu Yuhu,Zhang Zhenshu,Wu Jinbao et al. Nanfang Hospital,First Military Medical University,Guangzhou 510515,China
Abstract:
Keywords:colorectal neoplasms  phage  cDNA library
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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