| siRNA表达载体对293T细胞neuritin表达的抑制作用 |
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| 引用本文： | 张峤,罗星,黄瑾.siRNA表达载体对293T细胞neuritin表达的抑制作用[J].新疆医科大学学报,2012,35(6):762-769. |
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| 作者姓名： | 张峤 罗星 黄瑾 |
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| 作者单位： | 1. 新疆医科大学附属肿瘤医院化疗一科,乌鲁木齐,830011
2. 石河子大学新疆地方与民族高发病教育部重点实验室/生化室,新疆,石河子,832002 |
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| 摘 要： | 目的 观察siRNA表达载体对293T细胞神经生长因子neuritin的抑制作用,为进一步研究neuritin基因的功能及作用机制奠定基础.方法 通过RT-PCR技术筛选neuritin高表达细胞株;利用分子克隆技术,采用两步法构建 PBS/U6-neuritin siRNA(1～3)表达载体,脂质体法转染293T细胞,稳定转染后采用Western-blot技术进行干扰效率的筛选鉴定.结果 293T细胞与L-02细胞的RT-PCR产物为500 bp左右可见特异性条带,选择293T细胞作为实验细胞株,测序结果显示经2次构建后PBS/U6-neuritin siRNA表达载体在338 bp处出现发夹结构,说明构建成功.转染72 h后Western-blot技术检测PBS/U6-neuritin siRNA-(1～3)在不同程度上均可使293T细胞内源性Neuritin蛋白表达下调.结论 PBS/U6-neuritin siRNA(1～3)表达可以有效抑制293T细胞系Neuritin蛋白的表达.
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| 关 键 词： | RNA干扰 Neuritin蛋白 基因表达 |
Inhibiting effect of siRNA expression vector on neuritin in 293T cells |
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| ZHANG Qiao
,
LUO Xing
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HUANG Jin.Inhibiting effect of siRNA expression vector on neuritin in 293T cells[J].Journal of Xinjiang Medical University,2012,35(6):762-769. |
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| Authors: | ZHANG Qiao LUO Xing HUANG Jin |
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| Institution: | 1Department of Chemotherapy,A f filiated Tumor Hopsital,Xingjiang Medical University, Urumqi 830011,China;2Key Laboratory of Ministry of Education for Xinjiang Endemic and Ethnic Disease,Department of Biochemistry,Shihezi University,Shihezi 832002,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RNAi Neuritin gene expression |
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