尾加压素Ⅱ促进血管外膜成纤维细胞表达白细胞介素6

目的 探讨尾加压素Ⅱ（UⅡ）对大鼠血管外膜成纤维细胞表达白细胞介素6（IL-6）作用的影响及其细胞内信号转导机制。方法 雄性SD大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞体外同步化培养24 h后，于无血清DMEM培养基中加入UⅡ（10^－10～10^－7 mol/L），共孵育3～24 h。为了探索UⅡ的作用机制，加入细胞内不同的信号转导通路抑制剂，处理30 min后，加入UⅡ（10^－8 mol/L）共孵育3 h或12 h。实验结束时，收集细胞，采用逆转录-聚合酶链反应法检测细胞IL-6 mRNA表达（3 h）；另外，细胞实验结束后收集培养液，采用酶联免疫吸附测定法检测IL-6分泌水平（12 h）。结果 （1）UⅡ呈浓度（10^－10～10^－7 mol/L）和时间依赖性方式促进外膜成纤维细胞中IL-6 mRNA表达和蛋白分泌，至10^－8 mol/L UⅡ达高峰（P<0.01）；UⅡ（10^－8 mol/L）刺激IL-6基因表达3 h达高峰，蛋白分泌24 h达高峰（P<0.01）。（2）UⅡ促进外膜成纤维细胞表达IL-6的效应能被UⅡ受体阻断剂SB710411（10^－6 mol/L）、钙离子通道阻断剂尼卡地平（10^－5 mol/L）、丝裂原活化蛋白激酶抑制剂PD980959（10^－5 mol/L）、蛋白激酶C抑制剂H7（10^－5 mol/L）、Rho激酶抑制剂Y-27632（10^-5 mol/L）和钙调神经磷酸酶抑制剂环孢霉素A（10^－5 mol/L）所抑制（P<0.01）。结论 UⅡ明显促进大鼠主动脉外膜成纤维细胞IL-6的表达，该作用通过激活UⅡ受体、钙离子通道、丝裂原活化蛋白激酶、蛋白激酶C、Rho激酶和钙调神经磷酸酶信号途径来实现，提示UⅡ诱导外膜成纤维细胞表达IL-6升高可能是其参与动脉粥样硬化的重要机制之一。