| 真核表达载体pcDNA3.1(+)TPA的建立及其在人皮肤成纤维细胞的表达活性 |
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| 引用本文： | 邓洪波,杨宇,杨进福,唐滔,周文武,刘剑. 真核表达载体pcDNA3.1(+)TPA的建立及其在人皮肤成纤维细胞的表达活性[J]. 中南大学学报(医学版), 2005, 30(4): 373-378 |
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| 作者姓名： | 邓洪波 杨宇 杨进福 唐滔 周文武 刘剑 |
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| 作者单位： | 中南大学湘雅二医院,老年病科,长沙,410011;中南大学湘雅二医院,胸心外科,长沙,410011 |
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| 基金项目： | 基金项目：国家自然科学基金（30200280） |
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| 摘 要： | 目的：建立在人皮肤成纤维细胞中稳定表达的细胞株，为组织型纤溶酶原激活因子（TPA）功能分析和对缺血性心脏疾病基因治疗提供理论依据。方法：构建真核表达载体pcDNA3.1（+）TPA，然后将其转入人皮肤成纤维细胞，经G418筛选后，用RT PCR，ELISA和发色底物法观察外源性TPA表达情况。结果：真核表达载体pcDNA3.1(+)TPA在人皮肤成纤维细胞中获有效表达，酶联免疫吸附法TPA蛋白表达定量检测结果为每24小时643.5ng/106个细胞，高于未转pcDNA3.1（+）TPA的皮肤成纤维细胞每24小时19.2ng/106个细胞；发色底物法测得外源性TPA活性为每24小时122.6U/106个细胞，亦高于未转pcDNA3.1（+）TPA的皮肤成纤维细胞每24小时5.8U/106个细胞。结论：pcDNA3.1(+)TPA转入人皮肤成纤维细胞后，外源性TPA基因获有效表达，该细胞模型将成为TPA功能研究和缺血性心脏病基因治疗的重要方法。
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| 关 键 词： | 组织型纤溶酶原激活因子 基因治疗 pcDNA3.1 皮肤成纤维细胞 缺血性心脏病 |
| 文章编号： | 1672-7347（2005）04-0373-06 |
| 收稿时间： | 2005-04-29 |
| 修稿时间： | 2005-04-29 |
Experimental study on establishing eukaryotic expression vector pcDNA3.1(+)TPA and its expressing activity in human skin fibroblasts |
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| DENG Hong-bo,YANG Yu,YANG Jin-fu,TANG Tao,ZHOU Wen-wu,LIU Jian. Experimental study on establishing eukaryotic expression vector pcDNA3.1(+)TPA and its expressing activity in human skin fibroblasts[J]. Journal of Central South University. Medical sciences, 2005, 30(4): 373-378 |
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| Authors: | DENG Hong-bo YANG Yu YANG Jin-fu TANG Tao ZHOU Wen-wu LIU Jian |
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| Affiliation: | 1. Department of Gerontology; 2. Department of Cardiothoracic Surgery, Second Xiangya Hospital,Central South University, Changsha 410011, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | tissue plasminogen activator gene therapy pcDNA3.1( ) skin fibroblast ischemicheart diseases |
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