| 荧光定量PCR测定端粒长度 |
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| 引用本文： | 王敏敏,陈莹,王慧萍,冯时,王宇成,茅幼英,姜虹,陈江华,杨浩,刘广义,陈大进,陈文清,蔡洁茹,周芹,谢易,陈芷珉. 荧光定量PCR测定端粒长度[J]. 医学分子生物学杂志, 2009, 6(6). DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2009.06.005 |
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| 作者姓名： | 王敏敏 陈莹 王慧萍 冯时 王宇成 茅幼英 姜虹 陈江华 杨浩 刘广义 陈大进 陈文清 蔡洁茹 周芹 谢易 陈芷珉 |
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| 作者单位： | 浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心,杭州市,310003;浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心,杭州市,310003;浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心,杭州市,310003;浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心,杭州市,310003;浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心,杭州市,310003;浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心,杭州市,310003;浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心,杭州市,310003;浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心,杭州市,310003;浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心,杭州市,310003;浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心,杭州市,310003;浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心,杭州市,310003;浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心,杭州市,310003;浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心,杭州市,310003;浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心,杭州市,310003;浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心,杭州市,310003;浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心,杭州市,310003 |
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| 摘 要： | 目的 应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Q-PCR)方法测定端粒长度.方法 选取9种人类细胞株,提取基因组DNA,采用Q-PCR方法测定相对T/S比率,DNA印迹法测定末端限制性片段(TRF)长度,进行二者之间的相关性分析.结果 定量PCR测定端粒长度相对T/S比率为0.68±0.57,DNA印迹法测量平均TRF值为8.57±2.34,两种方法测定结果的相关性分析R2=0.7807(P＜0.01).结论 采用荧光定量PCR方法测量端粒长度具有重复性好、省时、简便、可靠的特点,可高通量处理大量样品.
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| 关 键 词： | 荧光定量聚合酶链式反应 端粒长度测定 T/S比率 |
Telomere Measurement by Quantitative PCR |
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| Abstract: | Objective To determine relative telomere length by quantitative PCR.Methods Genomic DNA was extracted from 9 types of human cells.Relative T/S ratios measured by quantitative PCR were compared with relative mean terminal restriction fragment(TRF)lengths in the same samples measured by traditional Southern blot methods.Results Relative R/S ratio measured by Q-PCR was 0.68±0.57,and relative mean TRF length was 8.57±2.34.By linear regression analysis,the correlation coefficient,R~2,for the relationship of T/S ratio to TRF length,was 0.7807(P＜0.001).Conclusion We have demonstrated the measurement of relative average telomere lengths by quantitative PCR,using a carefully designed pair of oligonucleotide primers.The assay is simple,rapid and reproducible,thus reliable for a high throughput of samples.It is recommendable to be used in study of telomere biology and genetic epidemiology of cancer and aging related diseases. |
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| Keywords: | fluorescence quantitative PCR determination of telomere length T/S ratios |
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