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犬贾第虫病毒转染载体介导的绿色荧光蛋白在犬贾第虫体内的表达
引用本文:陈丽凤,李建华,刘全,赵月平,曹利利,张西臣.犬贾第虫病毒转染载体介导的绿色荧光蛋白在犬贾第虫体内的表达[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2007,25(1):36-40.
作者姓名:陈丽凤  李建华  刘全  赵月平  曹利利  张西臣
作者单位:1. 吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062;河北科技师范学院,秦皇岛,066000
2. 吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062
3. 军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130062
摘    要:目的 构建犬贾第虫病毒(Giardia canis virus,GCV)转染载体。 方法 根据GCV基因组(DQ238861)的转录起始位点、复制起始位点及包装位点的序列特征和表达外源基因的顺式作用元件,将绿色荧光蛋白(GFP)基因替换GCV基因部分编码区,构建GCV基因与 GFP基因的嵌合体,并置T7启动子之下。用T7 RNA聚合酶体外转录后经电穿孔转染犬贾第虫滋养体,并用荧光显微镜检测GFP表达情况,间接ELISA测定转染后GFP的表达量。 结果 构建了犬贾第虫病毒重组质粒pGCV634/GFP/GCV2174, 经SacⅠ和NotⅠ双酶切得到约2.0和3.5 kb两条带,与预计值相符。由其介导的绿色荧光蛋白在犬贾第虫体内得到了高效表达,其表达量在转染后第1天达高峰(A490=1.8);以后随时间的延长而逐渐下降,14 d后绿色荧光信号基本消失。 结论 成功构建了犬贾第虫病毒转染载体,为贾第虫细胞基因表达调控的研究提供了方法。

关 键 词:犬贾第虫病毒  转染载体  绿色荧光蛋白
文章编号:1000-7423(2007)-01-0036-05
收稿时间:2006-03-03
修稿时间:2006年3月3日

Giardia canis Virus Transfection Vector-Mediated Expression of Green Fluorescent Protein in the Parasite
CHEN Li-feng,LI Jian-hua,LIU Quan,ZHAO Yue-ping,CAO Li-li,ZHANG Xi-chen.Giardia canis Virus Transfection Vector-Mediated Expression of Green Fluorescent Protein in the Parasite[J].Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases,2007,25(1):36-40.
Authors:CHEN Li-feng  LI Jian-hua  LIU Quan  ZHAO Yue-ping  CAO Li-li  ZHANG Xi-chen
Institution:College of Animal Science and Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062, China.
Abstract:
Keywords:Giardia canis virus  Transfer vector  Green fluorescent protein
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