RP-HPLC法测定三七总皂苷注射液中9种皂苷的含量

目的建立同时测定三七总皂苷注射液中多种皂苷成分的RP-HPLC法.方法 Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm);乙腈-水梯度洗脱,乙腈:0～30 min,18%→19%;30～35 min,19%→35%;35～60 min,35%→55%.流速1.5 ml·min-1;检测波长203 nm;柱温为40 ℃.结果三七皂苷R1,人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2 Rb3和Rd的线性范围分别为0.24～4.75 μg(r=0.999 9),0.57～11.40 μg(r=1.000 0),0.50～9.90 μg(r=1.000 0),0.24～4.80 μg(r=1.000 0),0.54～10.65 μg(r=1.000 0),0.26～5.10 μg(r=1.000 0),0.25～4.90μg(r=1.000 0),0.32～6.30 μg(r=1.0000);平均回收率为99.3%～100.2%.结论 RP-HPLC法可同时测定三七总皂苷注射液中9种皂苷含量,有利于其质量控制.     

忍冬藤饮片质量标准研究

目的 制定忍冬藤饮片的质量控制方法。方法 采用显微鉴别、薄层鉴别定性鉴别,采用高效液相色谱法测定饮片中的马钱苷。色谱条件：苯基硅烷键合硅胶色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.4％磷酸溶液(12:88),检测波长236 nm,流速1 mL·min^-1,柱温40 ℃。结果 非腺毛、木纤维、皮层纤维、表皮细胞、草酸钙簇晶、木化薄壁细胞等显微特征明显,显微鉴别方法专属性强;薄层色谱斑点清晰,阴性对照无干扰。马钱苷的进样量在0.086 8～1.302 0 μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系,相关系数r=0.999 9。平均回收率为100.0%,RSD=0.38%。测定山东、安徽、浙江等不同产地的19批样品,马钱苷含量以干燥品计算,结果在0.058%～0.863%区间分布。结论 本方法准确可靠、重现性好,可有效控制该饮片的质量。     

Reference antigen-free and antibody-free LTD-IDMS assay for influenza H7N9 vaccine in vitro potency determination

Influenza vaccines are the most effective intervention to prevent the substantial public health burden of seasonal and pandemic influenza. Hemagglutinin (HA), as the main antigen in inactivated influenza vaccines (IIVs), elicits functional neutralizing antibodies and largely determines IIV effectiveness. HA potency has been evaluated by single-radial immunodiffusion (SRID), the standard in vitro potency assay for IIVs, to predict vaccine immunogenicity with a correlation to protective efficacy. We previously reported that limited trypsin digestion (LTD) selectively degraded stressed HA, so that an otherwise conformationally insensitive biophysical quantification technique could specifically quantify trypsin-resistant, immunologically active HA. Here, we demonstrate that isotope dilution mass spectrometry (IDMS), a method capable of quantifying the absolute HA concentration without reference antigen use, can be further expanded by adding LTD followed with precipitation to selectively quantify the active HA. We test the LTD-IDMS assay on H7N9 vaccines stressed by low pH, raised temperature, or freeze/thaw cycles. This method, unlike SRID, has no requirement for strain-specific reference antigens or antibodies and can generate potency values that correlate with SRID. Thus, LTD-IDMS is a promising alternative in vitro potency assay for influenza vaccines to complement and potentially replace SRID in a pandemic when strain specific reagents may not be readily available.     

反相高效液相色谱法测定人血浆及尿样中普卢利沙星活性代谢物

目的建立分析人血浆及尿样中普卢利沙星活性代谢物浓度的反相高效液相色谱方法。方法样本用甲醇-乙腈(1 :1)沉淀后离心取上清液进行色谱分析。分析柱为Diamonsil C_(18)(250 mm×4．6 mm,5μm)。流动相为乙腈—0．05 mol/L磷酸二氢钾(pH2．2,含1%的四丁基溴化铵);血浆和尿样分析分别用20:80(V/V)、流速1．0 mL/min和12:88(V/V)、流速1．6 mL/mln。激发和发射波长分别为280 nm和425 nm。结果血浆和尿样测定的线性范围分别为0．005～5 mg/L(r= 0．9999)和0．05～5 mg/L(r=0．9999),最低检测浓度分别为0．002 mg/L和0．01mg/L。血浆5．00、0．50和0．05 mg/L浓度的相对回收率在100．64%～101．00%,日内和日间相对标准差(RSD)分别小于2．5%和4．6%。尿样2．50、0．50和0．10 mg/ L浓度的相对回收率在97．20%～100．20%,日内和日间RSD分别小于1．3%和4．3%。方法成功用于健康人口服普卢利沙星的药动学研究。结论本方法具有简便、快速、灵敏度高、重现性好等特点,适用于普卢利沙星的药动学研究。     

RP-HPLC法测定黄金搭档组合维生素片中叶酸的含量

目的建立黄金搭档组合维生素片中叶酸含量测定方法。方法用反相高效液相色谱法进行分析。色谱柱为L ichro-spher-C18柱,ODS(5μm,250 mm×4.6 mm),流动相为水-甲醇-0.25 mol.L-1庚烷磺酸钠溶液-乙酸-7%氨水(70∶30∶1.5∶1∶0.25),检测波长280 nm。结果峰面积与含量有良好的线性(r=0.9997);重复性好(RSD=1.26%);回收率高(X=97.6%,RSD=1.95%)。结论方法稳定,简便易行,快速准确,可作为此片剂质量检测方法。     

HPLC法测定氯沙坦钾胶囊含量

目的建立高效液相色谱法测定氯沙坦钾胶囊含量,为质量控制提供有效的分析手段。方法色谱柱:Phenom ene×ODSC18(5μm、4.6 mm×150 mm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(45∶55);检测波长:230 nm。结果制剂中辅料和有关物质对主药无干扰,氯沙坦钾在浓度100.2~350.8 mg.L-1范围内线性关系良好,相关系数r=0.999 9;平均回收率分别为99.36%、99.68%、99.40%,RSD为0.42%。结论本法专属性好,准确,简便,可有效控制本品质量。     

RP-HPLC法测定罗氟司特片的溶出度

目的：建立罗氟司特片溶出度的反相高效液相色谱法测定方法。方法：采用C18色谱柱（150mm×4.6mm,5.0μm）,以水∶乙腈（35∶65）为流动相,检测波长为215nm,柱温25℃,流速1.0ml/min。结果：罗氟司特溶出度测定的线性回归方程为A=425705C-273.88,r=0.9999,线性范围0.0506～0.9104μg/ml。平均回收率为99.77%,RSD为0.25%。结论：该方法操作简便,精密度高,重复性好,可用于罗氟司特片溶出度的测定。     

RP-HPLC测定地佐辛的含量

目的:建立地佐辛含量测定的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)。方法:色谱柱为SHIMADZV VP-ODS(250 mm×4.6 mm;5μm),流动相为乙腈-三乙胺溶液(20∶80),检测波长:281 nm,流速:1.0 m L/min,柱温:30℃,进样量:20μL。结果:地佐辛在0.05~0.30 mg/m L范围内线性关系良好,r=1.000 0;平均回收率为100.2%(RSD=1.0%)。结论:该法操作简便、结果准确,可以用于地佐辛的定量分析。     

高效液相色谱法测定金糖宁胶囊中1-脱氧野尻霉素的含量

目的:建立反相高效液相色谱-柱前衍生化法测定金糖宁胶囊中1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)的含量。方法:样品经处理过的D001-CC型阳离子交换树脂上用氨水洗脱收集后,用2 g·L-1的芴甲氧羰酰氯(FMOC-C1)柱前衍生化,再采用高效液相色谱-二极管阵列检测器测定。ODS-C18色谱柱(4.0 mm×250 mm,5μm),流动相乙睛-0.2%磷酸溶液梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长263 nm,柱温25℃。结果:1-脱氧野尻霉素在0.84~8.4μg线性关系良好(r=1.000 0),精密度RSD0.3%,重复性RSD 0.6%,衍生化后的样品溶液在24 h内稳定,平均回收率109.6%,RSD 0.4%。结论:该方法稳定可靠,重复性好,精密度高,可用于金糖宁胶囊中1-脱氧野尻霉素的含量测定。     

HPLC法测定溪黄草不同部位中5个二萜的含量

目的建立反相高效液相层析(RP-HPLC)法同时测定溪黄草不同部位中5个对映-贝壳杉烷型二萜类延命素[enmein,(1)],黄花香茶菜甲素[sculponeatin A,(2)],诺多星[nodosin,(3)],毛果青茶菜素[isodocarpin,(4)]和毛栲利素[lasiokaurin,(5)]含量的方法,并进行多批次药材成分分析,为溪黄草质量评价提供依据。方法采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸,梯度洗脱,流速0.7 m L·min-1,检测波长254 nm。结果 5个二萜的标准曲线及线性范围依次为:(1)Y=5246.4X+13.86(0.075~1.50μg,r=0.9999);(2)Y=4673.4X+78.09(0.121~2.43μg,r=0.9999);(3)Y=3459.4X+22.33(0.372~7.43μg,r=1);(4)Y=4432.8X+14.71(0.144~2.88μg,r=1);(5)Y=2434.1X+0.69(0.010~1.960μg,r=0.9999)。平均加样回收率为99.14%~100.7%,RSD为0.48%~2.53%。结论经过系统的方法学考察,该法简便,准确,重复性好,可用于溪黄草药材的质量分析及控制。