基于网络药理学和分子对接法探索肺毒清治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的潜在活性成分

目的以网络药理学和分子对接法探索肺毒清治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)活性化合物。方法利用中药系统药理学分析平台(TCMSP)获得肺毒清中木蝴蝶、栀子及苦参3味中药相关的成分和作用靶点,通过Uni Prot数据库查询靶点对应的基因;采用STRING平台构建靶点PPI网络;通过DAVID进行GO(gene ontology)生物过程及KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)通路富集分析,对核心靶点进行网络拓扑分析,运用Cytoscape 3.7.0构建成分-靶点网络,分析预测其作用机制。肺毒清中核心化合物与新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL水解酶进行分子对接,同时将结合能最低的前3位化合物与血管紧张素转化酶Ⅱ(ACE2)进行分子对接。结果成分-靶点网络得到269个节点,4204条边,其中包括槲皮素、β-谷甾醇、山柰酚等50个成分,关键靶点有JUN、AKT1、TP53、PTGS2、FOS、ESR1等。GO功能富集分析得到GO条目2 187个(P0.05),其中生物过程(biological process,BP)条目1 877个,细胞组成(cellular component,CC)条目105个,分子功能(molecularfunction,MF)条目205个;KEGG富集筛选得到25条信号通路(P0.05),主要有乙型肝炎通路、致癌通路、肿瘤坏死因子信号通路、胰腺癌、弓形虫病通路等;木犀草素(-26.78 kJ/mol)、槲皮素(-26.36k J/mol)、去甲脱水淫羊藿黄素(-25.94 kJ/mol)作用于SARS-CoV-2 3CL水解酶的分子对接结合能最低。结论肺毒清的活性化合物通过作用于JUN、AKT1、TP53、PTGS2、FOS、ESR1等靶点,与ACE2结合,调节多条信号通路,对COVID-19有潜在治疗作用。     

肺毒清冲剂抗病毒实验研究

目的 :观察肺毒清冲剂的抗病毒作用。方法 :体外抗病毒实验采用鸡胚法 ,以血凝反应为测定指标。体内抗病毒实验以病毒滴鼻法感染小鼠 ,观察肺毒清对肺指数、肺部病变程度的影响。结果 :肺毒清冲剂在药物浓度为 1∶10 0时可完全阻止流感病毒感染鸡胚。并且该方能抑制仙台病毒感染小鼠肺指数的升高 ,减轻肺部的病变程度。结论 :肺毒清冲剂具有良好的抗病毒作用     

不同制备工艺对肺毒清体外抗病毒作用的影响

目的:考察不同制备工艺对肺毒清处方药物体外抗病毒作用的影响.方法:采用体外抗病毒法对比肺毒清的水提取物(A)、水醇提取物(D)、水提醇沉物(B)及水提醇沉物的正丁醇萃取物(C)的抗病毒作用.结果:样品D在1 250 nmg·L-1下能完全抑制甲1型和甲3型流感病毒,250 mg·L-1样品A在60％细胞毒性下能完全抑制甲1型及甲3型流感病毒,其他样品对其他呼吸道病毒均无抑制作用,且样品D的体外抗病毒作用较样品A更好.结论:相同处方不同制备工艺对复方的药效作用具有一定影响.     

不同提取工艺对肺毒清抗炎、镇痛及解热作用的影响

目的:比较不同提取工艺(全方水提,栀子水提醇沉与苦参、木蝴蝶醇提,全方醇提,分别记为工艺1,2,3)对肺毒清抗炎、镇痛、解热作用的影响。方法:通过二甲苯致小鼠炎症实验比较不同提取工艺肺毒清的抗炎作用,通过冰乙酸扭体实验比较不同提取工艺肺毒清的镇痛作用,通过2,4-二硝基酚致大鼠发热比较不同提取工艺肺毒清的解热作用。结果:工艺1样品能显著抑制二甲苯致小鼠发炎(P0.05),工艺2样品能极显著抑制小鼠发炎(P0.01);工艺1样品能显著抑制冰乙酸致小鼠扭体次数(P0.05),工艺2和3样品能极显著抑制小鼠扭体次数(P0.01),且工艺2样品的抑制率高于工艺3;工艺2样品能显著抑制2,4-二硝基酚致大鼠发热。结论:提取工艺对肺毒清的药效有较大影响,工艺2样品的抗炎、镇痛、解热作用更好。